找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 10263|回复: 16

[试剂耗材] 流式抗体稀释

[复制链接]
发表于 2012-7-25 17:16:53 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请问流式抗体是用去离子水稀释还是用PBS稀释较合适?

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2012-7-25 17:21:59 | 显示全部楼层
强烈不建议稀释。
建议如果要减量,最好就使用减少体积的方式进行。

另外,那些所谓的抗体染色使用的量1:1000,是指抗体量:样本量,而不是把抗体稀释。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2012-7-26 16:31:45 | 显示全部楼层
但有些抗体浓度太浓,如 2mg/mL的浓度,体积减少到太小,很难吸到,故需要稀释一下抗体的浓度。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2012-7-26 16:52:57 | 显示全部楼层

哦。是自己打出来的抗体吗?

可以试试这个配方:

1%BSA(阻断非特异性结合和稳定作用)
0.1% 明胶 (阻断非特异性结合)
0.05% 叠氮钠 (防腐)
0.01M PBS, pH 7.2-7.4

混合均匀后,保存于4℃。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2012-7-26 17:14:05 | 显示全部楼层
我遇到一支抗体,是0.15ul至100ul细胞中。在具体使用时,是在临用前进行稀释,如100个样,则移出15ul抗体,加stain buffer稀释10倍至150ul。再用排枪每孔加入1.5ul。否则0.15ul完全没有办法进行加样。
这样做,染色结果也挺好的。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2012-7-26 17:47:47 来自手机 | 显示全部楼层
renping_jsnj 发表于 2012-07-26 17:14:05
我遇到一支抗体,是0.15ul至100ul细胞中。在具体使用时,是在临用前进行稀释,如100个样,则移出15ul抗体,

是的,如果临时现配现用的话直接用PBS稀释就可以。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2012-8-22 12:37:55 来自手机 | 显示全部楼层
学习了
来自: 流式中文网 iPhone客户端
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2012-9-10 20:05:45 | 显示全部楼层
老师说的好。我试试
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2012-9-11 16:40:48 | 显示全部楼层
一般使用FACS buffer稀释,也就是含1-2%FBS的DPBS。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2012-10-15 16:30:11 | 显示全部楼层
100ul细胞也是用PBS重悬的再加1ul抗体好,还是先把100ulPBS和1ul抗体混匀后再加进离心下来的细胞呢?这叫稀释抗体吗?
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2|浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-3-29 16:27

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表