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[凋亡检测] PI单染测凋亡

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发表于 2013-4-3 23:41:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
麻烦倪老师帮忙分析一下,实验是研究石棉对A549细胞凋亡的影响,由于石棉组细胞悬液中含有大量的石棉颗粒,所以G1峰前面的碎片显得特别多,尝试分析了一下,发现PI-A/PI-w门的位置对结果影响很大,总是拿捏不准!

PI测凋亡.rar

7.49 MB, 下载次数: 25

发表于 2013-4-4 10:06:19 | 显示全部楼层
我是这么做的,由于碎片颗粒和细胞之间的PI分群还是比较清楚的,所以FL2-A/FL2-W的点图还是容易圈的(见下面三个图)。
如果有可能,我建议再加上该细胞特异性的标记,这样先通过该标记设门,就更好的将石棉颗粒区分开来。

石棉1:

石棉1

石棉1


石棉2:

石棉2

石棉2


石棉3:

石棉3

石棉3

 楼主| 发表于 2013-4-6 13:27:28 | 显示全部楼层
嗯,加上该细胞特异性的标记是个好建议,就看能不能找到有特异性的标记!这几组细胞和颗粒还是算分得开,如果连在一起就真的不知怎样画门了。
 楼主| 发表于 2013-4-17 17:51:57 | 显示全部楼层
还有个问题,测了一管顺铂对A549细胞的影响,附图是R2 门的两种圈法,哪个合理?PI-A/PI-W下面那群细胞应该是死细胞和晚期凋亡细胞。
1.jpg
2.jpg
发表于 2013-4-17 19:13:17 | 显示全部楼层

当然是下面这个:)来自: Android客户端
发表于 2013-4-18 09:18:56 | 显示全部楼层
mayi009 发表于 2013-4-17 17:51
还有个问题,测了一管顺铂对A549细胞的影响,附图是R2 门的两种圈法,哪个合理?PI-A/PI-W下面那群细胞应该 ...

如果只分析周期的话,我觉得上面就可以了。
发表于 2013-4-18 09:20:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-4-4 10:06
我是这么做的,由于碎片颗粒和细胞之间的PI分群还是比较清楚的,所以FL2-A/FL2-W的点图还是容易圈的(见下 ...

倪老师,请问R1门怎么确定的?
发表于 2013-4-18 09:23:53 | 显示全部楼层
FCS 发表于 2013-4-18 09:18
如果只分析周期的话,我觉得上面就可以了。

晕死,昨天在手机上看,上下两个图是反的,所以我说是下面这个,看来手机客户端得改造一下,造成误解了。
应该说在手机客户端上,应该是下面的图,在普通电脑上,是上面这个图。准确的说,就是1.jpg。
发表于 2013-4-18 09:24:43 | 显示全部楼层
FCS 发表于 2013-4-18 09:20
倪老师,请问R1门怎么确定的?

R1门我圈的时候是尽可能排除碎片,粘连体通过第二个门来排除。
 楼主| 发表于 2013-4-18 12:15:07 | 显示全部楼层
如果是只分析周期当然好画门,问题是FL2-A/FL2-W下端那一团是细胞还是碎片?它在R1门内,应该大部分是细胞吧,我单独圈它时,发现它是在R1下方的,应该是DNA降解得差不多的死细胞或晚期凋亡细胞!??
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