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[图片] LIVE/DEAD BacLight 试剂盒分析细菌活力示例

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发表于 2013-4-10 12:24:59 | 显示全部楼层 |阅读模式

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这是@aivy 站友的实验结果,虽然低、中、高三个浓度没有差别,但是实验结果图形分布还是不错的,作为一种检测活力的方法,值得借鉴。FL1是syto-9,死细菌和活细菌均可染上,而FL2是PI,只会染上膜受损的细菌。

无菌水:

无菌水

无菌水

死活双染:

死活双染

死活双染

低浓度农用链霉素:

低浓度农用链霉素

低浓度农用链霉素

中浓度农用链霉素:

中浓度农用链霉素

中浓度农用链霉素

高浓度农用链霉素:

高浓度农用链霉素

高浓度农用链霉素

原帖:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2261-1-1.html
发表于 2013-4-11 14:58:21 | 显示全部楼层
FSC阈值是不是可以小点? 为啥只gate   ssc大的那团,下面那群是碎片还是啥?
还有这个FL1-fl2的图中,这个火箭峰这么厉害 ,是不是试剂特异性不好啊,还是补偿没调整? 斜成这样,圈p2和p3不合适吧
 楼主| 发表于 2013-4-11 15:55:38 | 显示全部楼层

下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非是补偿没调整的缘故,是允许的,不必担心。
发表于 2013-6-19 20:14:12 | 显示全部楼层
本帖最后由 wsnxbdr 于 2013-6-19 21:14 编辑
niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55
下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非 ...

这个火箭状的图,如果将对数坐标改为线性坐标,是不是就会得到两个圆形图?设门计数时应该就更方便了吧
 楼主| 发表于 2013-6-19 21:51:12 | 显示全部楼层
wsnxbdr 发表于 2013-6-19 20:14
这个火箭状的图,如果将对数坐标改为线性坐标,是不是就会得到两个圆形图?设门计数时应该就更方便了吧 ...

线性转为log会变圆,而log转为lin只会越来越长。:-)
发表于 2013-6-24 13:48:23 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55
下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非 ...

我刚刚试过,如果做了荧光补偿,这两个火箭状的图可以变成椭圆形的,而且会分别向两个坐标轴移动,变成了可以通过四象限设门分开的样子。
 楼主| 发表于 2013-6-24 14:12:01 | 显示全部楼层
wsnxbdr 发表于 2013-6-24 13:48
我刚刚试过,如果做了荧光补偿,这两个火箭状的图可以变成椭圆形的,而且会分别向两个坐标轴移动,变成了 ...

上图看看:)
发表于 2013-6-25 03:03:36 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-6-24 14:12
上图看看:)

两图分别是未设会何荧光补偿和设后的图形。并不是十分完美,但形状确实变化很大。

未设

未设

设后

设后
 楼主| 发表于 2013-6-25 09:18:53 | 显示全部楼层
wsnxbdr 发表于 2013-6-25 03:03
两图分别是未设会何荧光补偿和设后的图形。并不是十分完美,但形状确实变化很大。 ...

这样的调法似乎属于过度补偿了,你看原来右下那堆单阳性的信号全被压在X轴外了,况且,整体信号强度都不如没调的时候高。

其实象这种检测,本来就分群的,而且文献中也是这么直接分析的,我觉得没有必要去调它。
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