LIVE/DEAD BacLight 试剂盒分析细菌活力示例

niwanmao

这是@aivy 站友的实验结果，虽然低、中、高三个浓度没有差别，但是实验结果图形分布还是不错的，作为一种检测活力的方法，值得借鉴。FL1是syto-9，死细菌和活细菌均可染上，而FL2是PI，只会染上膜受损的细菌。

无菌水：

无菌水

死活双染：

死活双染

低浓度农用链霉素：

低浓度农用链霉素

中浓度农用链霉素：

中浓度农用链霉素

高浓度农用链霉素：

高浓度农用链霉素

原帖：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2261-1-1.html

niwanmao

wsnxbdr 发表于 2013-6-25 03:03

                               
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两图分别是未设会何荧光补偿和设后的图形。并不是十分完美，但形状确实变化很大。 ...

这样的调法似乎属于过度补偿了，你看原来右下那堆单阳性的信号全被压在X轴外了，况且，整体信号强度都不如没调的时候高。

其实象这种检测，本来就分群的，而且文献中也是这么直接分析的，我觉得没有必要去调它。

virginforest

FSC阈值是不是可以小点？ 为啥只gate   ssc大的那团，下面那群是碎片还是啥？
还有这个FL1-fl2的图中，这个火箭峰这么厉害 ，是不是试剂特异性不好啊，还是补偿没调整？ 斜成这样，圈p2和p3不合适吧

niwanmao

virginforest 发表于 2013-4-11 14:58

                               
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FSC阈值是不是可以小点？ 为啥只gate   ssc大的那团，下面那群是碎片还是啥？
还有这个FL1-fl2的图中，这 ...

下面这群通过反设门，认为是碎片，故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状，这是由这两个染料的特性所致，并非是补偿没调整的缘故，是允许的，不必担心。

wsnxbdr

niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55

                               
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下面这群通过反设门，认为是碎片，故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状，这是由这两个染料的特性所致，并非 ...

这个火箭状的图，如果将对数坐标改为线性坐标，是不是就会得到两个圆形图？设门计数时应该就更方便了吧

niwanmao

wsnxbdr 发表于 2013-6-19 20:14

                               
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这个火箭状的图，如果将对数坐标改为线性坐标，是不是就会得到两个圆形图？设门计数时应该就更方便了吧 ...

线性转为log会变圆，而log转为lin只会越来越长。:-)

wsnxbdr

niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55

                               
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下面这群通过反设门，认为是碎片，故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状，这是由这两个染料的特性所致，并非 ...

我刚刚试过，如果做了荧光补偿，这两个火箭状的图可以变成椭圆形的，而且会分别向两个坐标轴移动，变成了可以通过四象限设门分开的样子。

niwanmao

wsnxbdr 发表于 2013-6-24 13:48

                               
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我刚刚试过，如果做了荧光补偿，这两个火箭状的图可以变成椭圆形的，而且会分别向两个坐标轴移动，变成了 ...

上图看看：）

wsnxbdr

niwanmao 发表于 2013-6-24 14:12

                               
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上图看看：）

两图分别是未设会何荧光补偿和设后的图形。并不是十分完美，但形状确实变化很大。

wmj123456

niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55
下面这群通过反设门，认为是碎片，故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状，这是由这两个染料的特性所致，并非 ...

倪老师，关于SYTO9和PI染料，想请教您几个问题：1SYTO9是可以染活细胞和死细胞的，PI在一定的浓度下，进入细胞内，导致SYT09在细胞内浓度很低，所以分析的时候，就只是认为SYTO9只染活细胞了？
2做SYT09和PI双染的时候，有看到双阳的，请问这群细胞是属于哪种类型的细胞？如下图所示
3双阴性的是什么？这群细菌没有染上任何染料，属于背景？