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流式和定量PCR检测细菌活力的比较

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发表于 2013-4-15 13:04:24 | 显示全部楼层 |阅读模式

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一篇4月11日发表在Microbiology杂志上的文章,目前还是未排版的原稿样式。关于食品行业的细菌污染检测,比较了单叠氮丙啶定量PCR(PMA-qPCR)和流式两种方法在检测超临界CO2处理后3种细菌活性的结果(单核细胞增多性李斯特菌、肠炎沙门菌、大肠杆菌),并与细菌培养、荧光显微镜结果对比。流式与PMA-qPCR结果相当,但流式具备图形化的优势。其中的流式检测细菌活力方法还是值得参考。

流式检测方法:
两组:未处理、超临界二氧化碳处理的细菌悬液稀释至10E7-10E8 cells/ml,然后取1ml,加入10 μl SYBR-I (Merck, Darmstadt, Germany, 1:30000溶解在DSMO)和10 μl PI 1 mg/ml (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)。SYBR-Ⅰ激发波长495nm,发射波长525nm,PI激发波长536nm,发射波长617nm。标本室温避光孵育15分钟。

流式检测结果

流式检测结果

流式检测结果


处理后细菌活力和荧光显微镜观察结果

处理后细菌活力和荧光显微镜观察结果

处理后细菌活力和荧光显微镜观察结果


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