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血小板活化检测

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发表于 2010-8-1 19:15:23 | 显示全部楼层 |阅读模式

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标题:血小板活化检测

  1. 检测意义:
    1)  直接测量循环血小板活化状态与反应性;
    2)  可测定凝血酶等诱导剂活化的血小板,即通过血小板体外活化,评估病人血小板的活化能力;
    3)  血小板活化与临床的关系:监测血小板活化相关疾病过程,抗血小板药物疗效或治疗药物的影
    响,预测血栓形成;
    4)  心肌缺血(心绞痛、心肌梗塞)与血小板活化有关;
    5)  预测冠状动脉成形术后发生急性缺血事件的危险性;
    6)  缺血性脑血管病与血小板活化有关;
    7)  子痫前期、外周血管疾病等均有血小板活力增加;
    8)  抗血小板治疗疗效监测。 
  2. 检测特点:
    1)  使用流式细胞仪,同时分析血小板多个活化指标,灵敏、特异地检测全血中的血小板,了解血
    小板的反应性和活化进程;
    2)  直接使用全血,样本更接近生理状况;
    3)  操作步骤简便、用血量少、避免体外活化与血小板亚群丢失;
    4)  血小板减少患者也能精确分析。 
  3. 检测项目: 
    CD41或 CD61,CD62p,CD63 
  4. 检测标本: 
    柠檬酸钠抗凝全血。
  5. 推荐抗体组合:
    管号    FITC               PE
    1      Mouse IgG1     Mouse IgG1
    2      CD41 或 CD61  CD62p
    3      CD41 或 CD61  CD63
  6. 检测步骤:
    1.  抽取静脉血 2 mL,柠檬酸钠抗凝。血液采集后 1小时内进行实验;
    注:抽血时尽量不要用止血带,以免引起人为活化。
    2.  在流式管内加入 100 uL PBS和 5 uL 抗凝血;
    3.  加入适量的抗体和同型对照;
    4.  室温、避光染色 15  分钟;
    5.  加入 1 mL PBS,上机检测。
  7. 结果判断:
    正常人:
    血小板(CD41 或 CD61 阳性群)的 CD62p和 CD63 表达率均在 5\%以内。
     
    血小板活性增强者:
    血小板(CD41 或 CD61 阳性群)的 CD62p和 CD63 表达率均超过 5\%。

血小板活化检测

回答者:niwanmao

回复lionblue88:

IgG1是一管同型对照,用来设置阳性、阴性Marker的。

2009年8月12日 0:54

回答者:lionblue88

请问一下老师为什么要设“Mouse IgG1”这一个管呢?

 

2009年8月12日 0:54

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发表于 2021-4-26 11:49:53 来自手机 | 显示全部楼层
老师你好 请问枸橼酸钠抗凝管和柠檬酸钠抗凝管一样吗  枸橼酸钠抗凝管做血小板活化有影响吗
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发表于 2024-3-14 16:35:34 | 显示全部楼层
1        IgG-PE        IgG-FITC        IgG-APC
2        CD41-PE        IgG-FITC        IgG-APC
3        IgG-PE        CD62p-FITC        IgG-APC
4        IgG-PE        IgG-FITC        CD63-APC
5        CD41-PE        CD62p-FITC        CD63-APC
老师,我按照这个调电压和补偿,只有CD41有阳性,其他两个抗体都是阴性的,是什么原因啊?标本是全血,血小板用2%胶原激活的
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发表于 6 天前 | 显示全部楼层
adaliang1234 发表于 2024-3-14 16:35
1        IgG-PE        IgG-FITC        IgG-APC
2        CD41-PE        IgG-FITC        IgG-APC
3        IgG-PE        CD62p-FITC        IgG-APC

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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
adaliang1234 发表于 2024-3-14 16:35
1        IgG-PE        IgG-FITC        IgG-APC
2        CD41-PE        IgG-FITC        IgG-APC
3        IgG-PE        CD62p-FITC        IgG-APC

1、同型对照是否合适?
2、抗体性能有无经过验证,血小板阳性活化刺激物用ADP比较多,可先测试一下
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
我想毕业 发表于 2024-3-22 11:22
问问您现在解决这个问题了吗?我也是一直出现这个状况

参见5楼
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