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TUNEL法检测细胞凋亡图片示例

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发表于 2010-8-1 19:20:19 | 显示全部楼层 |阅读模式

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标题:TUNEL法检测细胞凋亡图片示例

晚期凋亡的细胞由于DNA的断裂,因而可以出现DNA ladder,从而也就有了经典的检测方法TUNEL。流式也能也能进行Tunel检测,其检测原理与经典Tunel原理基本一致。以BD公司的为例,其利用TdT能将荧光素标记的dUTP标记到断裂的DNA末端,从而使凋亡的细胞具有荧光。但是由于在细胞内标记,细胞需要进行固定处理,操作类似免疫组织化学法,容易造成假阳性。建议采用原装大厂的试剂盒,并且严格的设立对照。经过预实验方法稳定后再进行大规模实验。标本处理后,均可以用荧光纤维镜进行观察,拍照。流式检测后,可以进行精确的计算凋亡百分比。这一点,经典TUNEL是做不到的。

下图是利用dUTP与PI同时标记,图的上方为S期的凋亡细胞,dUTP阳性。

apobrdupos.gif

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发表于 2015-12-30 09:29:24 | 显示全部楼层
倪老师 我看不到图
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 楼主| 发表于 2015-12-30 20:31:17 | 显示全部楼层
54halley 发表于 2015-12-30 09:29
倪老师 我看不到图

2010年搬迁服务器时丢失了图片,现已补上,并返回流星。谢谢反馈。
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发表于 2016-9-27 15:01:11 | 显示全部楼层
老师。请问这个横坐标和纵坐标分别是什么呀?谢谢老师
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 楼主| 发表于 2016-9-27 19:58:56 | 显示全部楼层
vivi主子 发表于 2016-9-27 15:01
老师。请问这个横坐标和纵坐标分别是什么呀?谢谢老师

横坐标是PI染色,体现细胞的DNA含量,纵坐标则是TUNEL结果,体现的是DNA断裂情况。如此,可看出哪个周期的凋亡为主。
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发表于 2016-9-27 21:18:12 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-9-27 19:58
横坐标是PI染色,体现细胞的DNA含量,纵坐标则是TUNEL结果,体现的是DNA断裂情况。如此,可看出哪个周期 ...

倪老师,您好。又看了这个idea,想请问一下这两种染料共同处理是有专业的试剂盒子么?还是需要自己分别搭配两种染色处理?不知道有没有相关文献可以参考。
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 楼主| 发表于 2016-9-28 08:11:39 | 显示全部楼层
轩辕河图 发表于 2016-9-27 21:18
倪老师,您好。又看了这个idea,想请问一下这两种染料共同处理是有专业的试剂盒子么?还是需要自己分别搭 ...

可以自己搭配。也可以购买现成的,我知道BD有:http://www.bdbiosciences.com/ds/pm/tds/556381.pdf。至于其它公司,也应该会有。
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发表于 2016-10-14 15:50:47 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-9-27 19:58
横坐标是PI染色,体现细胞的DNA含量,纵坐标则是TUNEL结果,体现的是DNA断裂情况。如此,可看出哪个周期 ...

谢谢倪老师
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