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[流式protocol] PMG系列3:细胞表面染色操作流程

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发表于 2013-12-12 16:23:58 | 显示全部楼层 |阅读模式

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BD Pharmingen 12项中文指南系列之三:人外周血单个核细胞(PBMC)及悬浮细胞的细胞表面染色。(注:本系列中文指南为BD Pharmingen公司编译,故方法学中所用到的试剂均为Pharmingen的,如为使用其它公司试剂的,可在我们的protocol专版查找相关方法步骤)


细胞表面染色操作流程

细胞表面染色操作流程



 楼主| 发表于 2014-4-22 19:31:02 | 显示全部楼层
yain618 发表于 2014-4-22 09:59
最后固定,加1%的多聚甲醛,只固定30min,然后洗掉用Pbs重悬,放4度保存吗,一般可以保存多久。
我以前都 ...

从站友的测试结果看:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... =1759&fromuid=1,应该看标记而定。
所以我建议你最好先做过比较,如果比较后发现:
1、多聚甲醛固定之后对抗原结合没影响,就可以先加多聚甲醛,放冰箱里保存。具体时间确实没人做过,按照我们平时的经验,我估计4-7天应该可以。
2、如果多聚甲醛对抗原结合有影响,则应该先加抗体孵育,后加多聚甲醛固定,这个时候,由于抗体的荧光会衰减,所以最好不要超过24小时。
发表于 2014-2-25 16:11:45 | 显示全部楼层
这么好的资料,刚刚才看到。这里提供的资料真够全的,关键是我们要有发现的慧眼和勤劳的双手。
发表于 2014-4-22 09:59:26 | 显示全部楼层
最后固定,加1%的多聚甲醛,只固定30min,然后洗掉用Pbs重悬,放4度保存吗,一般可以保存多久。
我以前都是加1%的多聚甲醛后直接放4度,要测以前再用PBS洗涤、重悬、上机的。哪种方法对呢?
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