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[流式protocol] PMG系列4:BD核内因子染色流程

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发表于 2013-12-17 19:48:35 | 显示全部楼层 |阅读模式

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PMG系列4:BD核内因子染色流程(注:本系列中文指南为BD Pharmingen公司编译,故方法学中所用到的试剂均为Pharmingen的,如为使用其它公司试剂的,可在我们的protocol专版查找相关方法步骤)

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发表于 2016-1-16 20:42:25 | 显示全部楼层
请问老师第7步的加入350ul stain buffer可以用PBS代替么?
 楼主| 发表于 2016-1-16 20:53:33 | 显示全部楼层
暖希贤 发表于 2016-1-16 20:42
请问老师第7步的加入350ul stain buffer可以用PBS代替么?

可以试试。
发表于 2017-6-26 12:14:52 | 显示全部楼层
请问老师,我每次都是按照这个步骤来染色的,每次检测都说CD25和Foxp3没染上,不知道哪里可能出现问题了?
 楼主| 发表于 2017-6-26 19:37:34 | 显示全部楼层
燕燕 发表于 2017-6-26 12:14
请问老师,我每次都是按照这个步骤来染色的,每次检测都说CD25和Foxp3没染上,不知道哪里可能出现问题了? ...

CD25染不上,抗体出问题可能性较大,但首先需要确定你的标本肯定有。
而foxP3会跟很多因素有关:破膜剂、抗体、Treg细胞是否存在等等。
发表于 2018-11-21 14:00:23 | 显示全部楼层
请问下老师,这个protocol里面的350g离心转速,是用那种离心15ml离心管的离心机离心的转速吗?如果用离心1.5ml EP管的离心机是不是转速就得加大了。因为离心半径不一样,离心力还是有区别的。不清楚此protocol上的这个350g针对的是哪一种离心机而言?期待您的解答,这对我很重要,最近做胞内染色结果总是不理想,万分感谢。
 楼主| 发表于 2018-11-22 09:01:00 | 显示全部楼层
winteran 发表于 2018-11-21 14:00
请问下老师,这个protocol里面的350g离心转速,是用那种离心15ml离心管的离心机离心的转速吗?如果用离心1. ...

g是离心力,与离心直径无关。
离心转速,是跟离心直径有关的。
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