查看: 5438|回复: 11
收起左侧

[流式protocol] PMG系列7:人外周血样本Phosflow操作流程

[复制链接]
发表于 2013-12-23 19:30:09 | 显示全部楼层 |阅读模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?加入流式中文网

x
这里介绍的是Pharmingen第7个系列中文操作流程:人外周血样本BD Phosflow操作流程。该流程中包含了4个方法:Detergent method(方法1)、Mild or harsh alcohol method(方法2和3)、Harsh Detergent Method(方法4)。


第1页

第1页

第2页

第2页

第3页

第3页

第4页

第4页

第5页

第5页

第6页

第6页



发表于 2014-12-31 10:20:39 | 显示全部楼层
倪老师,若果只做细胞表面标记的染色,也需要破膜吗?
 楼主| 发表于 2014-12-31 10:21:11 | 显示全部楼层
yuxuemeifeng 发表于 2014-12-31 10:20
倪老师,若果只做细胞表面标记的染色,也需要破膜吗?

细胞表面当然不需要破膜:)
发表于 2014-12-31 10:24:55 | 显示全部楼层
谢谢,刚才又看到了表面染色的步骤。
发表于 2017-6-20 16:48:58 | 显示全部楼层
倪老师,我们近期做全血中NK和T细胞中的某磷酸化指标,用的是Perm II,刺激时间设定为15min,每次用同样的刺激剂作用,得到的磷酸化水平很难稳定,每次测得的结果都不一样,而且阳性很弱。请问做磷酸化有哪些关键注意的点。
 楼主| 发表于 2017-6-20 18:06:02 | 显示全部楼层
babyface 发表于 2017-6-20 16:48
倪老师,我们近期做全血中NK和T细胞中的某磷酸化指标,用的是Perm II,刺激时间设定为15min,每次用同样的刺 ...

需要排除两个问题:
一个是破膜剂效率问题,另一个是抗体问题。
发表于 2017-6-21 15:35:53 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-6-20 18:06
需要排除两个问题:
一个是破膜剂效率问题,另一个是抗体问题。

好的,谢谢倪老师。
发表于 7 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-6-20 18:06
需要排除两个问题:
一个是破膜剂效率问题,另一个是抗体问题。

倪老师好,我打算做病毒感染后p—stat3 stat5,试剂还没到,看到操作步骤都要用刺激剂,我看到的文献里结核感染后测同样指标没用到刺激剂,但表达水平很低,我估计我测的应该表达也比较低,请问是否需要刺激剂,表达量太低分群不明显是否对判断结果有很大影响,同时使用刺激剂量后能用刺激后表达情况来反应不同感染组间pstat3等的活化程度吗,还是只是看基础pstat3表达情况,谢谢
 楼主| 发表于 7 天前 | 显示全部楼层
snelgar 发表于 2018-9-18 17:35
倪老师好,我打算做病毒感染后p—stat3 stat5,试剂还没到,看到操作步骤都要用刺激剂,我看到的文献里结 ...

如果是病毒感染样本,可以试着直接测。破膜可用甲醇。
发表于 7 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-9-18 17:52
如果是病毒感染样本,可以试着直接测。破膜可用甲醇。

谢谢老师
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

流式中文网    

联系我们: mail#flowcyto.cn (#改为@)

GMT+8, 2018-9-25 15:31

Powered by Discuz! X3.2

© 2001-2013 Comsenz Inc.