查看: 3572|回复: 1
收起左侧

[流式protocol] PMG系列8:人PBMC Phosflow操作流程

[复制链接]
发表于 2013-12-24 20:08:37 | 显示全部楼层 |阅读模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?加入流式中文网

x

这里介绍的是Pharmingen第8个系列中文操作流程:人外周血单个核细胞BD Phosflow操作流程。该流程中包含了4个方法:Detergent method(方法1)、Mild or harsh alcohol method(方法2和3)、Harsh Detergent Method(方法4)。

第1页

第1页

第2页

第2页

第3页

第3页

第4页

第4页

第5页

第5页

第6页

第6页



发表于 2016-10-13 21:21:05 | 显示全部楼层
老师您好,我在做磷酸化流式的时候遇到一些问题,烦请您指教。我做的是TCR通路的磷酸化,ficoll法分离PBMCs,用纯化的CD3 1ug/ML CD28 2ug/ML刺激15min,37℃。染的是PKC-γ1 PE、zap70 percp-cy5.5、SHP2 PE、Src PE(分为4管单染),用相同处理方法的细胞做空白对照,分别试了方案1和方案2,结果没有一管出阳性.请问这种情况是哪里可能出问题呢。查了之前您上传的文献《Single-Cell Phospho-Protein Analysis UNIT 8.17 by Flow Cytometry》里面ZAP70用的是IgM+H2O2刺激的。是不能用CD3+CD28刺激呢?抑或刺激的量与方法不对?
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

流式中文网    

联系我们: mail#flowcyto.cn (#改为@)

GMT+8, 2017-1-19 14:25

Powered by Discuz! X3.2

© 2001-2013 Comsenz Inc.