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使用荧光染色和流式细胞术监测产溶剂梭菌的生理变化

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发表于 2014-6-19 21:15:14 | 显示全部楼层 |阅读模式

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厌氧梭状芽胞杆菌属可存在于土壤、海洋沉积物、植物、动物和人体消化道和伤口中,具有系统发育多样性和物种多样性。
致病性种类如肉毒杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌和艰难梭菌的出孢通常伴随着毒素的形成,而且产溶剂类梭菌的出孢可伴随溶剂的产生。
目前,最著名的产孢子梭状芽孢杆菌是艰难梭菌,是导致严重院内感染的病菌。
尽管梭状芽孢杆菌是非常重要的致病菌,但目前关于它们与其他产孢菌的比较很少。因此,需要开发一种新方法,来监视它们的生理变化,而流式细胞术是一种非常有用的工具,因为它可以进行单细胞分析。

流式细胞术目前在细菌学上最常见的应用是计算一个群体中活细菌的数量,在此应用中,需要使用某些荧光染料标记细胞(如检测膜完整性、酯酶活性、跨膜电位),Petra Patakova在Anaerobe. 2014 Oct;29:113-7上使用三种常见的活性荧光染料(bis-
(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethineoxonol (BOX), propidium
iodide (PI) and carboxy fluorescein diacetate (CFDA))区分两种产溶剂梭菌群体。

详细方法见文章的方法学部分。

两种梭菌三种染料的荧光变化图如下,遗憾的是文中没有把流式散点图放上来,只放了这种统计数值变化曲线图。
fig2.gif


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