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[结构和原理] 流式分析外小鼠周血中性粒细胞,单核细胞亚群问题

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发表于 2015-9-23 11:21:42 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
求助版内大神,这是小弟做的小鼠外周血单核细胞亚群的分析,其中FITC-Ly6G+和APC-CD11b+为中性粒,Ly6G-和PerCP5.5-Ly6Chigh/low为单核细胞亚群,有几个问题想请教下:
1.为何CD11b的阳性象限那么偏左,是因为抗体浓度么(我1:500)?
2.这种做法需要加lin-筛选么?
3.为何我的细胞分群都不是很明显呢(P6,P7)
实在是谢谢各位了


无标题.jpg
发表于 2015-9-23 20:25:36 | 显示全部楼层
1、CD11b APC荧光强度太弱,跟抗体用量不足有关。
2、所谓LIN是多种系列特异性抗体混合组成,针对的是那些非B非T非NK非粒非单核的细胞,你这个单核细胞有特异性标记,没有必要。
3、P6、P7如果觉得区分不清,可尝试用一下密度图或等高线图,会比较清楚。
 楼主| 发表于 2015-9-23 20:38:50 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-9-23 20:25
1、CD11b APC荧光强度太弱,跟抗体用量不足有关。
2、所谓LIN是多种系列特异性抗体混合组成,针对的是那些 ...

实在太谢谢老师了
发表于 2019-1-19 01:42:48 | 显示全部楼层
1:500太夸张,我们平时都1:50-1:200, 200一般是高表达且之前用过很亮的抗体。
发表于 2019-1-26 00:01:28 | 显示全部楼层
小鼠的不要忘记用Fc受体阻断剂CD16/32
发表于 2019-2-11 17:47:21 | 显示全部楼层
想问一下老师,一般中性粒细胞如果要用marker来鉴定的话,是不是就是Ly6g和CD11b双阳的细胞就是(通用)?
发表于 2019-2-11 18:25:32 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2019-2-11 17:47
想问一下老师,一般中性粒细胞如果要用marker来鉴定的话,是不是就是Ly6g和CD11b双阳的细胞就是(通用)? ...

请看这篇:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6502-1-1.html
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