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[淋巴细胞相关] 四色流式检测,第四种荧光选择PEcy5还是PerCPcy5.5?

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发表于 2015-11-19 15:36:57 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏2流星未解决
大家好,我在做淋巴细胞表面一些marker的检测,已经有三个marker的抗体分别是FITC,PE,APC标记的,现在要增加第四个marker,做四色荧光检测,请问用PEcy5还是PerCPcy5.5,哪个更合适一些?谢谢

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发表于 2015-11-19 19:29:30 | 显示全部楼层
都行,补偿上差不多。
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发表于 2015-11-22 12:55:46 | 显示全部楼层
PerCPcy5.5更好一些,查询荧光光谱会看到PECY5在红激光下也会有激发,发射光谱和APC几乎重叠,如果表面maker不强是很难调的。PerCPCY5.5在红激光先虽然也有激发但是激发相对小了很多,而且发射光谱和APC相差很大,所以两者的补偿比较好调。

论坛里面有一篇巴西流式协会推荐的临床检测急性白血病4色方案(http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=3358 的帖子。里面染料用的是PerCPCY5.5而不是PECY5,是有一定道理的

PECY5+APC

PECY5+APC

PerCP5.5+APC

PerCP5.5+APC

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 楼主| 发表于 2016-1-26 09:15:36 | 显示全部楼层
a86856635 发表于 2015-11-22 12:55
PerCPcy5.5更好一些,查询荧光光谱会看到PECY5在红激光下也会有激发,发射光谱和APC几乎重叠,如果表面make ...

谢谢,我买了PerCPcy5.5的
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发表于 2017-3-2 22:59:37 | 显示全部楼层
PerCPcy5.5更好一些,查询荧光光谱会看到PECY5在红激光下也会有激发,发射光谱和APC几乎重叠,如果表面maker不强是很难调的。PerCPCY5.5在红激光先虽然也有激发但是激发相对小了很多,而且发射光谱和APC相差很大,所以两者的补偿比较好调。

请帮解释下:图上哪个是发射光谱,激发光谱  ?   完全理解上面这句话的意思
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发表于 2017-3-3 07:49:38 | 显示全部楼层
zj8237277 发表于 2017-3-2 22:59
PerCPcy5.5更好一些,查询荧光光谱会看到PECY5在红激光下也会有激发,发射光谱和APC几乎重叠,如果表面make ...

虚线是激发光,实线是发射光。
理论上如此,但实际上还是可以做的。
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发表于 2017-3-3 11:43:07 | 显示全部楼层
percp5.5, Pecy5和Percp都会被红光激发,导致补偿比较大
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