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[试剂耗材] 这俩染料需要调节补偿么?

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发表于 2016-11-4 22:04:50 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
7-AAD和APC,检测机器参数7-AAD用PerCP(EX:488nm   filters:675/30)通道检测  ,APC(EX:640nm   filters:675/30)通道检测(filters就是相同的)看了下荧光光谱:
488NM 2016-11-04_215503.jpg

640NM 2016-11-04_215516.jpg

机器上这俩个是不同的通道。请问这还需要调节补偿么?





流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2016-11-7 08:39:47 | 显示全部楼层
很小,因为两者激发光不一样,所以他们会在不同光路上。
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 楼主| 发表于 2016-11-7 09:47:38 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-11-7 08:39
很小,因为两者激发光不一样,所以他们会在不同光路上。

溢漏小,那不同光路是否需要调节补偿?
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发表于 2016-11-7 11:10:47 | 显示全部楼层
就是说你所说的两种 补偿会很小  可以不用补偿
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2016-11-7 11:45:25 | 显示全部楼层
sunzheng_99 发表于 2016-11-7 11:10
就是说你所说的两种 补偿会很小  可以不用补偿

更关注的是对于多小的百分比就不需要做补偿?有相关文献记载么。
另外不同光路间是否存在荧光溢漏?
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发表于 2016-11-7 18:17:38 | 显示全部楼层
ps654321 发表于 2016-11-7 09:47
溢漏小,那不同光路是否需要调节补偿?

这两个通道我们平时都在用,几乎没有补偿,要找文献肯定也找的到,就是比较麻烦。
像PerCP和PE之类的为什么会有补偿,就是因为他们在同一光路上面,是从488nm激发后同一束光依次反射分出来的,所以需要调节补偿。而APC488nm激发不了,是640激发的,所以是另一条路走的。
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发表于 2016-12-1 18:59:39 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-11-7 18:17
这两个通道我们平时都在用,几乎没有补偿,要找文献肯定也找的到,就是比较麻烦。
像PerCP和PE之类的为什 ...

老师您好,有没有颜色配对不需要做补偿的相关的文献或者资料。
如果这样的话,尽量选择这样的搭配就会省很多事情。
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发表于 2016-12-1 19:30:59 | 显示全部楼层
jiangmeng 发表于 2016-12-1 18:59
老师您好,有没有颜色配对不需要做补偿的相关的文献或者资料。
如果这样的话,尽量选择这样的搭配就会省 ...

FITC和APC
紫光通道和FITC
紫光通道和APC
………
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2016-12-6 23:48:57 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-12-1 19:30
FITC和APC
紫光通道和FITC
紫光通道和APC

谢谢老师。
老师还有个问题请教一下,我想在一个标本里面加入六个抗体做流式,但是我只需要分析单种颜色,不需要结合起来分析。
这个时候我是不是可以不用做补偿?还有这几种抗体的同型对照抗体可不可以加在一起?
这种情况有什么该注意的?还有应该设置哪些对照?
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发表于 2016-12-7 13:30:24 | 显示全部楼层
jiangmeng 发表于 2016-12-6 23:48
谢谢老师。
老师还有个问题请教一下,我想在一个标本里面加入六个抗体做流式,但是我只需要分析单种颜色 ...

1、不管分析几个标记,只要在一管内,并且荧光光谱之间存在重叠,就需要调节补偿。
2、你这个已经属于多色实验了,建议在进行FcBlock之后,用FMO对照设门,不要用同型对照。你可站内搜索“同型对照”查找相关知识恶补一下。
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