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[流式protocol] 流式中文网MemMagician新型破膜剂使用说明

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发表于 2016-12-25 15:38:15 | 显示全部楼层 |阅读模式

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包装:50Tests、100Tests

使用步骤:
1、在空白流式管,加入表面抗体,然后加入100ul 样本,避光、室温作用10分钟。直接加入A液60ul(样本:A液=5:3),作用5分钟。
2、加入2ml PBS,充分吹打均匀,500×g离心5分钟,尽量去干净上清。
3、以100ul PBS重悬。
切记:对重悬后的样本体积进行评估,一般大约在130ul~150ul左右
4、加入B液30ul(样本:B液=5:1),并接着加入要检测的胞内抗体,避光、室温作用20~25分钟。
5、加入2ml PBS,充分吹打均匀,500×g离心5分钟,去上清,根据需要,用100~500ul PBS重悬,上机检测。
综合上述所有操作步骤,总时间为45~50分钟。

小贴士:
(1)B液同时可破膜和裂解红细胞,无需额外裂解红细胞,为提高效果,建议在孵育10分钟时取出振荡一下为佳。
(2)如果要检测轻链或免疫球蛋白,建议事先用10倍体积的PBS洗涤三次,然后再执行后续操作。
(3)少数特殊患者样本可能在最后一步离心后仍可见红细胞成团明显,建议加2ml 1×氯化铵裂解液,继续作用10分钟,观察颜色是否澄清,如仍无变澄清,可反复多次。
(4)检测过程中必须使用的PBS(磷酸盐缓冲液)请自备,亦可用生理盐水代替。


临床应用实例:


2016120502YangZhongHuiPerfix.jpg
用于对比的某商业化破膜剂,FSC减小明显,表面标记影响较大。但胞内结果稳定。
2016120502YangZhongHui对比.jpg
同样的标本,用流式中文网原研的MemMagician新型破膜剂,无需额外裂红,时间缩短,FSC和表面标记保持稳定,比例与商业化破膜剂无显著差异。而价格亲民

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