从正常小鼠肠粘膜提取的淋巴细胞，FSC、SSC如何圈？

lily丽 · 发表于 2017-3-9 16:11:05

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各位朋友好！可以帮我看看下面的流式图吗？是从正常小鼠肠粘膜提取的淋巴细胞，FSC、SSC那张圈群正确了吗？那长长的黑色的代表什么？谢谢！
https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=MTIxMzF8ZDgyNTdkN2V8MTcxMzQ2ODcwMXwwfA%3D%3D

niwanmao · 发表于 2017-3-9 18:33:49

死细胞和凋亡细胞。

PS：发帖请选择各个提问的版块，悬赏提问，谢谢配合。

whyxa · 发表于 2017-3-10 01:32:22

无论你是小鼠肠黏膜刮取的，还是机械剪断，酶松解的细胞，组织细胞都应该加染live/dead，去除死细胞，用Live/Dead阴性细胞群进行后续的设门分析，哪些细胞确实多数是死细胞，还有部分上皮细胞，此外SSC电压可以在适当的高一些

lily丽 · 发表于 2017-3-10 10:34:01

niwanmao 发表于 2017-3-9 18:33
死细胞和凋亡细胞。

PS：发帖请选择各个提问的版块，悬赏提问，谢谢配合。 ...

那我那圈的一群是淋巴细胞吗？

lily丽 · 发表于 2017-3-10 10:36:23

whyxa 发表于 2017-3-10 01:32
无论你是小鼠肠黏膜刮取的，还是机械剪断，酶松解的细胞，组织细胞都应该加染live/dead，去除死细胞，用Liv ...

谢谢老师，我每次都是自动调电压，感觉每次做流式调的电压都不一样，我要怎么固定调电压呢？

niwanmao · 发表于 2017-3-10 20:04:28

lily丽发表于 2017-3-10 10:34
那我那圈的一群是淋巴细胞吗？

是，但是不是全部淋巴细胞，需要通过CD3反设门看看。

whyxa · 发表于 2017-3-11 03:57:26

lily丽发表于 2017-3-9 18:36
谢谢老师，我每次都是自动调电压，感觉每次做流式调的电压都不一样，我要怎么固定调电压呢？ ...

我不明白你说的自动调电压是怎么回事，我用的是BD 的 Diva，在设置cytometer setting 的时候，FSC-A，和SSC-A 我都是凭习惯设置未291，291，最好设置为相同的电压，相同补偿，要不然前后对结果的批间差异还是有影响。

lily丽 · 发表于 2017-3-13 18:30:38

whyxa 发表于 2017-3-11 03:57
我不明白你说的自动调电压是怎么回事，我用的是BD 的 Diva，在设置cytometer setting 的时候，FSC-A，和 ...

好的，谢谢老师！

lily丽 · 发表于 2017-3-13 18:30:58

niwanmao 发表于 2017-3-10 20:04
是，但是不是全部淋巴细胞，需要通过CD3反设门看看。

好的，谢谢老师

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