流式分析图中EGFP的荧光覆盖mcherry荧光？

Vivivivi

上次发帖问关于EGFP与mCherry作为报告基因在做流式分析时通道的选择，绿色荧光选用的1通道，红色选用的3通道。可是分析结果中，绿色单阳性的百分比2.9%，按道理说是不应该出现绿色荧光单阳性的结果，会出现红色荧光mcherry单阳性的结果，可是不知道为什么上样好几个，普遍都是出现EGFP单阳性，是因为mcherry的荧光被EGFP覆盖了么？所以会有部分细胞双阳性但是表现出EGFP单阳性的结果么？

Vivivivi

做流式分选时结果上也是显示出EGFP单阳性的结果而mCherryd单阳性的细胞很少，几乎没有

niwanmao

那个帖子中的站友们说过了（http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... =5741&pid=32100）：最好用561nm激发，如果用488nm激发需要很强的荧光才测的到，而你用的机器应该是C6，没有配备561nm激光，所以用488nm是测不到弱表达的荧光。
而图上所看到的双阳性，实际上补偿没有调整到位的假双阳性。

Vivivivi

niwanmao 发表于 2017-3-12 20:49
那个帖子中的站友们说过了（http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=redirect&goto=findpost&ptid=5741& ...

好的，明白了，非常感谢！