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[细胞周期] 细胞周期检测时,可否用2倍体的位置代替G2期细胞

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发表于 2017-4-8 12:48:41 | 显示全部楼层 |阅读模式

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老师们好:

我想检测某一细胞周期的细胞表达某个蛋白,可否用这样一个简便的方法:如图所示,两个gate的细胞正好对应细胞周期的G1峰和G2峰,这样的话,如果我再用另外一个荧光抗体染色细胞,用散点图看看两个gate中这个蛋白染色情况,是否可以?


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发表于 2017-4-8 13:12:00 | 显示全部楼层
当然可以,只是对染色操作会要求比较高,细胞可能不能用乙醇固定了。
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 楼主| 发表于 2017-4-10 08:02:23 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-4-8 13:12
当然可以,只是对染色操作会要求比较高,细胞可能不能用乙醇固定了。

谢谢,我的细胞是用乙醇固定的。曾经试着圈了门,前一个峰大致相当于G1期细胞,后一个峰大致相当于G2期,只是这里面没有办法区分S期和M期,也没有看到有类似做法的文献。niwanmao老师,不知道这样的做出来的结果可靠不?有没有相应的文献推荐一下,谢谢!
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发表于 2017-4-10 12:54:32 | 显示全部楼层
cneagle 发表于 2017-4-10 08:02
谢谢,我的细胞是用乙醇固定的。曾经试着圈了门,前一个峰大致相当于G1期细胞,后一个峰大致相当于G2期, ...

G1和G2之间就是S期啊,可以用Modfit软件拟合出来的。
但是要把G2期和M期区分开,就不能单纯用PI了,而是需要结合组蛋白和Ki67等,参考:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2809-1-1.html

然而,这得不再次提醒,用乙醇固定过,其它标记基本上都标不上去,所以需要购买商品化细胞周期试剂盒,而且是非乙醇固定的那种。
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 楼主| 发表于 2017-4-10 15:13:21 | 显示全部楼层
niwanmao老师好,多谢您的回复。我把流式散点图发上来,你看看。从这两个图上,结合modfit软件,可以大致圈到G1期,也可圈到G2(或者是G2M)期细胞,如果我再用另外一个CD分子(比如CD4),然后利用散点图这样大致圈到的G1、G2期细胞,观察CD4的阳性细胞数,是否可以?
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