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[结构和原理] 样本分群怎么样

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发表于 2017-4-10 20:25:57 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
Fl1

FL1是IgE抗体,单标嗜碱性粒细胞,血液样本,不知道这样的分群是不是还可以 Data Set 3_ F2-2017-03-29-141321-3 [Ungated] SS _ FL1.png Data Set 3_ F2-2017-03-29-141321-3 [Ungated] FL1.png

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2017-4-11 08:15:08 | 显示全部楼层
分群好的应该是下图这样的:
屏幕快照 2017-04-11 上午8.14.12.jpg



文献源:http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/cyto.b.20042/full
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 楼主| 发表于 2017-4-11 09:18:58 来自手机 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-4-11 08:15
分群好的应该是下图这样的:



嗯,不知道什么原因,老师这样的情况怎么改变啊
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2017-4-11 19:49:13 | 显示全部楼层
wksnzh 发表于 2017-4-11 09:18
嗯,不知道什么原因,老师这样的情况怎么改变啊

你尝试一下参考那篇文章,刺激一下嗜碱粒细胞看看?同时滴定一下抗体浓度。
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 楼主| 发表于 2017-4-12 16:03:23 来自手机 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-4-11 19:49
你尝试一下参考那篇文章,刺激一下嗜碱粒细胞看看?同时滴定一下抗体浓度。 ...

取100ul血液,加抗体孵育30min, 氯化铵裂解液裂解三次,pbs清洗两次,100ulpbs重悬,老师操作步骤有问题么?
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发表于 2017-4-12 19:30:36 | 显示全部楼层
wksnzh 发表于 2017-4-12 16:03
取100ul血液,加抗体孵育30min, 氯化铵裂解液裂解三次,pbs清洗两次,100ulpbs重悬,老师操作步骤有问题 ...

裂解三次、洗涤两次?这个次数太多了吧,容易丢失细胞。
可考虑加入20倍体积以上的氯化铵裂解液,10分钟后离心一次即可。
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 楼主| 发表于 2017-4-12 19:54:41 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-4-12 19:30
裂解三次、洗涤两次?这个次数太多了吧,容易丢失细胞。
可考虑加入20倍体积以上的氯化铵裂解液,10分钟 ...

我每次都是假2ml,10min. 裂解一次后试管底部很红,感觉一次会有很多红细胞
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发表于 2017-4-12 20:11:25 | 显示全部楼层
wksnzh 发表于 2017-4-12 19:54
我每次都是假2ml,10min. 裂解一次后试管底部很红,感觉一次会有很多红细胞

裂解液配制有没有问题?买好一点的试剂原料。
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