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[结构和原理] 请问小鼠免疫后测脾细胞中的Th1/Th2/Th17,需要跑多少个event?

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发表于 2017-4-14 10:32:57 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
请问倪老师小鼠免疫后测脾细胞中的Th1/Th2/Th17,需要跑多少个event?分离脾细胞---抗原刺激6天----PMA等刺激6h-12h----染色上机

BD的说明书上说2-3万个CD4阳性event

谢谢

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一般目的细胞大概在5000个就能出比较漂亮的流式图了,比如检测的细胞(打个比方,Treg好了)只占1%,你需要收50万个event,如果占50%,那1万个event就够了。因为event的显示数目可以通过流式分析软件调整,所以一般都是多收一些比较保险。
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发表于 2017-4-14 10:32:58 | 显示全部楼层
一般目的细胞大概在5000个就能出比较漂亮的流式图了,比如检测的细胞(打个比方,Treg好了)只占1%,你需要收50万个event,如果占50%,那1万个event就够了。因为event的显示数目可以通过流式分析软件调整,所以一般都是多收一些比较保险。
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发表于 2017-4-14 11:32:32 | 显示全部楼层
BD说明书这个要求也足够用了。这三类细胞比例还算可以的。
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 楼主| 发表于 2017-4-14 16:02:40 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-4-14 11:32
BD说明书这个要求也足够用了。这三类细胞比例还算可以的。

我一共就跑了10000个!!
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 楼主| 发表于 2017-4-14 16:48:33 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-4-14 11:32
BD说明书这个要求也足够用了。这三类细胞比例还算可以的。

倪老师   检测不同样品中间   是不是得洗一下吸头?
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发表于 2017-4-14 19:07:52 | 显示全部楼层
saureus 发表于 2017-4-14 16:48
倪老师   检测不同样品中间   是不是得洗一下吸头?

一般机器在不同样本之后都会有自动反冲的动作,不需要特地去洗涤的。
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 楼主| 发表于 2017-4-15 07:13:35 | 显示全部楼层
多谢二位老师的经验分享!
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发表于 2017-5-19 08:57:10 | 显示全部楼层
不知道你是什么机器,不过应该不管什么机器,都可以设置终止条件的,你可以设置Th1(你要设置这个门)...等细胞数达到一定量时终止啊,比如2000(2000貌似是最低要求)
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