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[细胞周期] 新手会圈门 R1 R2 但是不会用modfit分析细胞周期

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发表于 2017-4-19 14:46:50 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏3流星未解决
  我采用的细胞周期方法是流式中文网protocol的那种,加triton 和RNase 室温15min的那种,流式机子用的是贝克曼的,modfit用的是新版的在试用期的那种,目前遇到的问题是1)把流式数据拷出来后不知道怎么分析,看了modifit教程,怎么自己操作出来的结果对不上呢?,control组在机子自带的分析软件上看着是正常的,用这个modfit分析后,感觉不正常了,PS (G1 怎么可以自己调,这样不准的吧?);2)我做的是凋亡,drug 1 是载阿霉素制剂,drug2是修饰过配体的载阿霉素制剂,镜下看到drug2的情况更残所以就拿出来做流式了,但是跑出来怎么感觉sub G1期没多多少,碎片多了,镜下细胞虽然有点残,但是80-90%的细胞仍是贴壁的啊。所有的附件都在压缩包里了。
话先停下,上图更清晰点:
感谢各位大神指点指点!!

control

control

drug 1

drug 1

drug 2

drug 2

新建文件夹.zip

2.5 MB, 下载次数: 8

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2017-4-19 14:53:26 | 显示全部楼层
对了对了,细胞用的就是普通的HeLa肿瘤细胞,6孔板做的,其余还有什么我都会一一回答,新人一枚,和大家一起学习进步,掌握 流式细胞周期凋亡检测
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2017-5-3 11:18:03 | 显示全部楼层
楼主求modfit破解版
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2017-5-3 13:16:28 | 显示全部楼层
默背你的心碎 发表于 2017-4-19 14:53
对了对了,细胞用的就是普通的HeLa肿瘤细胞,6孔板做的,其余还有什么我都会一一回答,新人一枚,和大家一 ...

奇怪,之前的问题居然漏掉了。
这个主要还是设置的问题,Manual Analysis有个问题就是有时候设好位置之后,如果峰不是很明显,它最终的位置会逃掉,此时,最好是使用sync Wizard功能,能够方便的拖动G1和G2位置。
G1按道理是同类标本之间相对比较接近,但是需要用量、细胞密度等均调节到一致,如果不一致,导致G1期偏移,是允许调节的,毕竟峰在那里。

最后提醒一下,对照的排除粘连体效果挺好,后面几个样本似乎有点怪,可尝试一下不同群都看看。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2017-5-5 19:24:37 | 显示全部楼层
多谢站长了,目前问题已经自己摸索解决的差不多了,我认为其实这些比例不是特别固定死的,主要是看一个大体趋势,对了顺便回答楼上的问题,我用的是modfit的试用版,也没有破解。。
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