细胞内活性氧检测

淮南垂钓者 · 发表于 2017-4-21 19:48:30

本帖最后由淮南垂钓者于 2017-4-21 19:58 编辑

最近做L02细胞加药后的活性氧染色，H2O2（300uM）阳性对照组染上了，对照组和加药组都没有染上，我是在加药后6h，原位装载探针，用的Invitrogen的D399探针，然后PBS洗一次，消化下来重悬，再用PBS洗一下，然后流式上机。麻烦各位给些指导建议，谢谢了。

NC：是Blank；11：H2O2（300uM）阳性对照；L3-1：对照组；L3-3: 加药组.

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niwanmao · 发表于 2017-4-21 22:08:21

阳性对照组能染上，说明染色条件应该是正确的，那么是否意味着药物不影响活性氧呢？

淮南垂钓者 · 发表于 2017-4-21 23:08:38

谢谢您的帮助和建议，我看别人文献里都做出来了，我第一次也染上了，就是最近两次都没染上，步骤也没改，真的想不出哪里出问题了，哎，好郁闷

niwanmao · 发表于 2017-4-23 16:01:13

淮南垂钓者发表于 2017-4-21 23:08
谢谢您的帮助和建议，我看别人文献里都做出来了，我第一次也染上了，就是最近两次都没染上，步骤也没改，真 ...

别人能做出来，不能保证你也肯定做出来，但并非意味着肯定就是你错，如果设置好正确的阴性和阳性对照之后，仍做不出来，或许反而是一篇更好的文章。你看韩春雨的事情就知道了。

淮南垂钓者 · 发表于 2017-4-25 16:59:10

niwanmao 发表于 2017-4-23 16:01
别人能做出来，不能保证你也肯定做出来，但并非意味着肯定就是你错，如果设置好正确的阴性和阳性对照之后 ...

谢谢您给的建议和帮助，我自己再重复下看看。

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