应用SSC划定单细胞的问题

steven

各位老师大家好，又来提问了。
上次请教了FSC-A／H祛除双联体细胞的问题，今天继续请教一下应用SSC划分的问题。
有人说因为A／W之间没有什么关联性，所以用来区分粘连更有效，所以我也想进行一下尝试。
上传了两张图，一张是论文中的图，一个是我模仿做的图。现在有以下几点请教大家。
1.应用SSC-A／W区分粘连的原理是什么，怎么样划门？
2.论文中经过SSC-A／W划门之后，又进行了一步FSC-H／W的划门，是进一步祛除粘连吗？为什么用的H和W，没用H和A？还是说可以随意选择？
3.我的结果中，SSC-A／W的图中，细胞有很大一部分都在顶端框外，框了一下，大概有40%，和论文中的图像完全不一样？是什么原因呢，应该调节哪个参  
   数让细胞能全显示在图中？
4.因为没能成功的应用SSC图划门，所以我做了一个FSC-A／H的图，效果还可以吗？

期待大家的解答。

niwanmao

原理和FSC一样，请仔细阅读这两个帖子：
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4333-1-1.html
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5691-1-1.html

至于为什么和别人的不一样，与一些细节设置有关，如果你是BD的仪器，请参考第二个帖子中的设置，设置好FSC-Area Scaling

steven

niwanmao 发表于 2017-5-30 14:56
原理和FSC一样，请仔细阅读这两个帖子：
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-4333-1-1.html
http://www.flo ...

谢谢老师指导。我做的图中SSC-W特别高，有40%的细胞都在框外（图2），W和Area Scaling参数无关吧，怎么把细胞拉下来，全都显示在图上呢？降低SSC的电压吗？（BD Aria III）

niwanmao

steven 发表于 2017-5-31 12:58
谢谢老师指导。我做的图中SSC-W特别高，有40%的细胞都在框外（图2），W和Area Scaling参数无关吧，怎么把 ...

Area Scaling是针对FCS，调节后你那个FSC-W/A会好看。
SSC的话，试着调电压看看效果吧。

steven

niwanmao 发表于 2017-5-31 14:02
Area Scaling是针对FCS，调节后你那个FSC-W/A会好看。
SSC的话，试着调电压看看效果吧。 ...

好的 有结果了再来汇报