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[标本处理] 同一份样品,肽刺激与肽不刺激时细胞大小发生改变

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发表于 2017-6-5 13:39:26 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
本帖最后由 vvvme 于 2017-6-5 14:34 编辑

拿小鼠脾淋巴细胞分选出CD8后做的胞内细胞因子染色检测IFN--g,好几次发现,同一份样品肽刺激孔和肽不刺激孔的细胞FSC值发生改变,除了这个不同其他的操作都一样,实在不懂为什么会出现这种状况,请求各位前辈帮忙解答!万分感谢!

下图1,左图是肽刺激的细胞,右图是肽不刺激的细胞。


而分选后CD8-细胞的情况则相反,如图2所示

CD8+T

CD8+T

CD8-T

CD8-T
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发表于 2017-6-5 15:15:24 | 显示全部楼层
图很小,看的不是特别清楚。但是这点差异是很正常的,刺激之后细胞大小肯定会发生改变的,这是由于细胞状态变化引起的。
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 楼主| 发表于 2017-6-5 15:19:11 | 显示全部楼层
那我批量处理数据的时候,圈门的大小不变,但是位置还是可以微调的是么?
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 楼主| 发表于 2017-6-5 15:19:30 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-6-5 15:15
图很小,看的不是特别清楚。但是这点差异是很正常的,刺激之后细胞大小肯定会发生改变的,这是由于细胞状态 ...


那我批量处理数据的时候,圈门的大小不变,但是位置还是可以微调的是么?
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发表于 2017-6-5 16:19:37 | 显示全部楼层
感觉你的阳性细胞群所在通道电压有点低,个人认为圈门大小可以微调,只要确定是所需要分析的细胞就可以了
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发表于 2017-6-5 19:20:29 | 显示全部楼层
vvvme 发表于 2017-6-5 15:19
那我批量处理数据的时候,圈门的大小不变,但是位置还是可以微调的是么? ...

设门的位置可以微调的。
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 楼主| 发表于 2017-6-6 10:36:53 | 显示全部楼层
774055480 发表于 2017-6-5 16:19
感觉你的阳性细胞群所在通道电压有点低,个人认为圈门大小可以微调,只要确定是所需要分析的细胞就可以了 ...

老师请问这个调电压有啥标准么,我每次调都是能分出两团细胞就行了,但是每批试验的一致性就难以保证了,如果做重复试验的话,次与次之间的差异还是蛮大的
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 楼主| 发表于 2017-6-6 10:37:23 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-6-5 19:20
设门的位置可以微调的。

好的,谢谢倪老师
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