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[标本处理] 我的DC为什么有这么多的碎片啊?

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发表于 2017-7-21 17:36:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
这是从PBMC里面诱导分离DC细胞,为什么有很多碎片啊?其实我也不确定。细胞团还不到20%。

002_B.jpg
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发表于 2017-7-21 22:46:06 | 显示全部楼层
碎片的含量跟阈值设置有关,可把阈值稍微调高一些。
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 楼主| 发表于 2017-7-21 22:53:09 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-7-21 22:46
碎片的含量跟阈值设置有关,可把阈值稍微调高一些。

倪老师,我参考别人的文章,一样的实验,那些细胞应该不是碎片是淋巴细胞。不会有80%的细胞碎片的。
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 楼主| 发表于 2017-7-21 22:55:54 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-7-21 22:46
碎片的含量跟阈值设置有关,可把阈值稍微调高一些。

我把数据用CD45/ssc分析了一下,细胞基本都是CD45阳性的,应该不是碎片吧。
11.jpg
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 楼主| 发表于 2017-7-21 22:56:45 | 显示全部楼层
cellprobe 发表于 2017-7-21 22:55
我把数据用CD45/ssc分析了一下,细胞基本都是CD45阳性的,应该不是碎片吧。 ...

FL4是CD45标记的。
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发表于 2017-7-21 23:01:46 | 显示全部楼层
cellprobe 发表于 2017-7-21 22:55
我把数据用CD45/ssc分析了一下,细胞基本都是CD45阳性的,应该不是碎片吧。 ...

那么那些不是碎片喽,而是淋巴细胞和单核了。那这个CD123有点问题了。
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 楼主| 发表于 2017-7-21 23:33:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-7-21 23:01
那么那些不是碎片喽,而是淋巴细胞和单核了。那这个CD123有点问题了。

CD123有啥问题?请问为什么淋巴细胞和单核细胞为什么这么多啊?但是这个CD123的分析是来自于DC细胞的,我把DC圈出来了。谢谢
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 楼主| 发表于 2017-7-21 23:35:47 | 显示全部楼层
DC里面CD123的表达还是很高的。
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发表于 2017-7-22 13:56:07 | 显示全部楼层
cellprobe 发表于 2017-7-21 23:33
CD123有啥问题?请问为什么淋巴细胞和单核细胞为什么这么多啊?但是这个CD123的分析是来自于DC细胞的,我 ...

我不知道你的细胞来源是什么?PBMC?
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 楼主| 发表于 2017-7-22 15:13:34 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-7-22 13:56
我不知道你的细胞来源是什么?PBMC?

是先把PBMC培养2个小时,洗去没有贴壁的细胞,然后分化培养。

点评

干嘛直接要诱导,直接检测PBMC的外周血就可以了,先用line 1-HLADR+ 细胞群就是DC,然后CD11c+的就是mDC,CD123+就是pDC  发表于 2017-7-22 21:56
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