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[流式相关软件] 双染测细胞凋亡结果图求助

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发表于 2017-12-12 10:05:47 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位老师好,流式小白前来求助。我用Annexin-V-FITC/PI凋亡检测试剂盒,按照试剂盒操作染色之后,用Guava easy cyte 6 HT-2L流式细胞仪(美国默克密理博公司)检测,操作步骤也是按照默克工程师说的步骤,分析也是用的流式随机软件,可是出来的图总是堆在一堆,药物处理组也没有明显的作用,求助老师们指导一下,谢谢!

另:试剂盒是国产的,细胞数>10^5

阳性对照.png
药物处理.png
阴性对照.png
发表于 2017-12-12 12:10:21 | 显示全部楼层
1、确定一下FITC和PE在这个机器是否对应这两个通道。
2、这两个通道的坐标请设置为LOG,目前的LIN坐标是不行的。
 楼主| 发表于 2017-12-12 14:08:03 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-12-12 12:10
1、确定一下FITC和PE在这个机器是否对应这两个通道。
2、这两个通道的坐标请设置为LOG,目前的LIN坐标是不 ...

我咨询过工程师,说是相对应的,我再看看怎么设置成LOG,谢谢倪老师
发表于 2017-12-12 14:19:54 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-12-12 12:10
1、确定一下FITC和PE在这个机器是否对应这两个通道。
2、这两个通道的坐标请设置为LOG,目前的LIN坐标是不 ...

老师,请问一下,凋亡流式的时候,需要为什么需要单阳管调电压,而不能直接blank调电压,双阳管测定凋亡?
发表于 2017-12-12 19:11:08 | 显示全部楼层
a3351460 发表于 2017-12-12 14:19
老师,请问一下,凋亡流式的时候,需要为什么需要单阳管调电压,而不能直接blank调电压,双阳管测定凋亡 ...

单阳性管是调节补偿,不是电压。用Blank调节电压,但是Blank的细胞要选择那种加药处理过的,可以体现细胞本底。
发表于 2017-12-17 16:31:23 | 显示全部楼层
我也用的是这台仪器,建议数值这样设置!
PI用的是Red-B通道检测
FITC建议用Green-B通道检测
B{3B74F)Y}L_K[]E{)}5G04.png
发表于 2017-12-17 16:32:55 | 显示全部楼层
log再这里找
_APDR231N~Q6C8M3OI~4]EV.png

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 楼主| 发表于 2018-1-5 14:43:34 | 显示全部楼层
初学者一号 发表于 2017-12-17 16:31
我也用的是这台仪器,建议数值这样设置!
PI用的是Red-B通道检测
FITC建议用Green-B通道检测 ...

非常感谢!更正过后的图确实是您发的这样子的,太感谢了!另外想请教您有没有用这台仪器测过PI单染测细胞周期?如果有的话是怎么设置的呢?我的图里的峰分不开,没有办法区分各个时期
发表于 2019-6-6 17:01:56 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-12-12 19:11
单阳性管是调节补偿,不是电压。用Blank调节电压,但是Blank的细胞要选择那种加药处理过的,可以体现细胞 ...

老师您好,那要是检测不同浓度药物对细胞凋亡的影响,我的实验组是不同浓度药物,对照组是空白细胞直接染色的。程序时电压用什么细胞调呢?谢谢老师
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