这是细胞么？

dailian

我用流式细胞仪分选人外周血PBMC，得到CD4+CD25-Teff和CD4+CD25+CD127lowTreg细胞，在96孔平底板中分别设Teff不加anti-CD3/CD28组不然（染CFSE），Teff组（不染CFSE），Teff（加入anti-CD3/CD28染CFSE），Teff+Treg（加入anti-CD3/CD28染CFSE）。anti-CD3/CD28（bead：cell=1：1），CFSE（1uM），每孔均加入IL-2（100U/ml）刺激增值4-5d。Teff：5万，Treg：2.5万。但是加入anti-CD3/CD28的孔出现了这种串珠样的圆形东西，请问大家这是细胞么？Teff和Treg细胞应该是什么样的？图一是Teff不加anti-CD3/CD28组不然（染CFSE），图二是Teff+Treg（加入anti-CD3/CD28染CFSE），图三是放大的结果，图四是在荧光显微镜下观察的结果Teff

niwanmao

你拿分选出的细胞对比一下看看，感觉像是污染的菌

燕仔zoe

几倍镜下的图？感觉上像是什么球菌

dailian

这个是40倍镜下的细胞，本身淋巴细胞就很小，加上我加的是anti-CD3/CD28的磁珠，这个小的是磁珠

otoizz

T细胞活化会导致增殖，密度大的时候会形成梅花样聚集。你这个密度不大也许就是粘连的串珠样。你的cd3-8beads应该有尺寸吧，是不是和细胞差不多？

dailian

otoizz 发表于 2017-12-22 11:01
T细胞活化会导致增殖，密度大的时候会形成梅花样聚集。你这个密度不大也许就是粘连的串珠样。你的cd3-8bead ...

还是比细胞小很多的，后面想着用磁珠上机前还得用磁力板吸出来，后面就用PHA来刺激增殖了