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[标本处理] CFSE然后流式上机检测问题

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发表于 2017-12-28 14:02:06 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
倪老师,您好,今天做了一个实验,CFSE染色的细胞再染胞外PE染料的样本上机检测Calibur补偿调不下去,FL1与FL2区分不开,后又尝试在C6流式细胞仪上机,同样的问题,FL1与FL2区分不好。我想咨询您一下,CFSE是不可以与PE染料共染,流式上机检测不?
因为今天是预试验,调补偿等操作一直不能成功,所以我们有保存原数据,没有图片。。。

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可以同时染,但是确实存在补偿无法调节到位的Bug,你可以选择其它荧光素,尽量远离CFSE的发射光谱。
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发表于 2017-12-28 14:02:07 | 显示全部楼层
可以同时染,但是确实存在补偿无法调节到位的Bug,你可以选择其它荧光素,尽量远离CFSE的发射光谱。
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发表于 2017-12-28 16:08:25 | 显示全部楼层
两个是可以同时染的,CFSE类似于FITC。
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 楼主| 发表于 2017-12-30 08:04:34 | 显示全部楼层
ghqiu09 发表于 2017-12-28 16:08
两个是可以同时染的,CFSE类似于FITC。

我们也染过,用C6那种傻瓜机器勉强还能调,但是Calibur就不行了。。。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2017-12-30 08:06:08 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-12-28 14:02
可以同时染,但是确实存在补偿无法调节到位的Bug,你可以选择其它荧光素,尽量远离CFSE的发射光谱。 ...

是的,我之前和PE的CD4同时染,在C6上可以区分开,可能与CD4的强表达有关系,我现在染的是PE没那么强表达量也只有10%左右的,好像调不开,严重漏光
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