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[标本处理] PE-Cy7-CD19染色

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发表于 2018-1-28 11:24:32 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
这是用PE-Cy7染的CD19,未破膜的单染管只有阴阳两群,为什么破膜后会有三群?

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发表于 2018-1-28 23:35:08 | 显示全部楼层
破膜之前培养了吗?培养、刺激会对细胞有影响,所以与只单染表染的细胞有差别吧
发表于 2018-1-29 08:18:22 | 显示全部楼层
1、是否同时染了其它标记?如有,是否因补偿?
2、是否其它细胞非特异性染色的干扰?可从FSC/SSC以及其它荧光参数散点图进行判断。
 楼主| 发表于 2018-1-29 23:08:59 | 显示全部楼层
鑫鑫点灯灯 发表于 2018-1-28 23:35
破膜之前培养了吗?培养、刺激会对细胞有影响,所以与只单染表染的细胞有差别吧 ...

破膜之前培养了,与单染表染的有差别,单染表染管是只有一群的,但是以前做的一般是图会变得难看点,不会出现这么明显的两群
 楼主| 发表于 2018-1-29 23:34:47 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-1-29 08:18
1、是否同时染了其它标记?如有,是否因补偿?
2、是否其它细胞非特异性染色的干扰?可从FSC/SSC以及其它荧 ...

1、还染了FITC-CD24,APC-CD38,以及胞内染了PE。重新用FLOWJO调了下补偿还是一样,没有太大改变
2、在染抗体前加了Fc-block的,不过不知道用散点图怎么判断,麻烦老师教下
发表于 2018-1-30 10:27:23 | 显示全部楼层
mzzq1993 发表于 2018-1-29 23:34
1、还染了FITC-CD24,APC-CD38,以及胞内染了PE。重新用FLOWJO调了下补偿还是一样,没有太大改变
2、在染抗 ...

你把其它各个组合的散点图都放出来看看。
 楼主| 发表于 2018-1-31 16:05:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-1-30 10:27
你把其它各个组合的散点图都放出来看看。

以上就是各个组合的图,倪老师,PE-Cy7分成三群会不会是抗体解偶联了

CD19

CD19

CD24CD38/CD19

CD24CD38/CD19

IL-10/CD19

IL-10/CD19
发表于 2018-1-31 21:13:21 | 显示全部楼层
mzzq1993 发表于 2018-1-31 16:05
以上就是各个组合的图,倪老师,PE-Cy7分成三群会不会是抗体解偶联了

我是希望能够看到各个邻近通道的散点图组合,这些散点图都不算。
 楼主| 发表于 2018-2-3 12:09:33 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-1-31 21:13
我是希望能够看到各个邻近通道的散点图组合,这些散点图都不算。

倪老师,您说的是这些吗?这就是全部通道组合的图了,不好意思哈,我不是很理解
APC FITC.png
APC PE.png
APC PE-Cy7.png
FITC APC.png
FITC PE.png
FITC PE-Cy7.png
PE APC.png
PE FITC.png
PE PE-Cy7.png
PE-Cy7 APC.png
PE-Cy7 FITC.png
PE-Cy7 PE.png
发表于 2018-2-3 23:01:01 | 显示全部楼层
mzzq1993 发表于 2018-2-3 12:09
倪老师,您说的是这些吗?这就是全部通道组合的图了,不好意思哈,我不是很理解
...

综合整体看,弱表达那群是对的,高表达属于非特异信号
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