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[结构和原理] 凋亡PI的荧光

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发表于 2018-3-14 21:58:51 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请问下,最近遇到一个问题,之前一直做凋亡,用的BD的试剂盒,Annexin V/PI双染,然后散点图通过FITC和PE两种染料看,操作过程中需要调节补偿。偶然间,老师说,这个机器是可以吧PE和Percp-Cy5.5分开的,用FITC和Percp-cy5.5这两个组合来看~~也就是说,Percp-Cy5.5更接近于PI染料的发射光吗?麻烦各位老师指点了

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发表于 2018-3-14 23:53:39 | 显示全部楼层
话不多说,看图吧。
Untitled.jpg

你可以看到,PE和PerCP-Cy5.5通道都能接收到PI的光,不过具体哪个更好取决于你们配的Filter。
可以用这个网址查询:https://www.bdbiosciences.com/us/s/spectrumviewer
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发表于 2018-3-15 20:24:29 | 显示全部楼层
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调,谨慎使用。
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发表于 2018-3-16 01:19:41 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-3-15 20:24
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调,谨慎使用。

他意思好像是用PerCp-Cy5.5收PI,然后另一个通道用FITC,这样基本上不用补偿,要是用PE通道收PI,补偿比较多
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 楼主| 发表于 2018-3-18 22:57:32 | 显示全部楼层
robert1988 发表于 2018-3-14 23:53
话不多说,看图吧。

谢谢您,明白了
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 楼主| 发表于 2018-3-18 22:57:53 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-3-15 20:24
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调,谨慎使用。

谢谢您~
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发表于 2018-4-20 16:43:32 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-3-15 20:24
PI和PERCP-CY5.5的补偿会比较难调,谨慎使用。

老师您好,PI补偿比较难调的话,那还是建议用PE和FITC两个通道检测么?看上面发的图感觉PE和FITC的重叠更多呀?
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发表于 2018-4-20 17:11:02 | 显示全部楼层
一丢丢呐 发表于 2018-4-20 16:43
老师您好,PI补偿比较难调的话,那还是建议用PE和FITC两个通道检测么?看上面发的图感觉PE和FITC的重叠更 ...

PE和FITC的补偿好调的,尤其是你做的是凋亡,补偿问题不大的。不用纠结这个问题的。
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发表于 2018-4-20 17:20:56 | 显示全部楼层
livan724 发表于 2018-4-20 17:11
PE和FITC的补偿好调的,尤其是你做的是凋亡,补偿问题不大的。不用纠结这个问题的。 ...

好的,谢谢!
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