IL-17单染管为什么IFN-GAMA会有很高表达？

yangmengbo · 发表于 2018-4-2 11:14:39

本帖最后由 yangmengbo 于 2018-4-2 11:27 编辑

图片6.png

想请教各位大神一个问题，我们想分析CD4阳性的细胞里的Th1和Th17的比例。这是IL-17 PE的单染管，因为是单染管，所以没有染CD3-FITC,CD8-PERCP,IFN-GAMA APC，所以理论上CD3+CD8-的细胞应为0，且IL-17 PE和IFN-GAMA比例也应该为0。为什么还是有0.13%的CD3+CD8-的细胞？而且IFN-GAMA比例高达24.2%？麻烦各位指教一下，谢谢！

774055480 · 发表于 2018-4-2 11:14:40

猜测应该是一些非特异性染色的结果，建议加上FCblock吧，另外，PE通道表达除了非特异性染色之外还有一个可能是电压过高导致的。

niwanmao · 发表于 2018-4-3 16:57:31

从你这个图形看，首先CD3＋细胞就稀稀拉拉几个，假如算20个，有2个阳性就是10％了，比例当然就不准了。

首先要排除掉碎片，其次保证CD3＋细胞获取到5万个以上，最好10万以上。

yangmengbo · 发表于 2018-4-4 19:39:15

774055480 发表于 2018-4-2 18:30
猜测应该是一些非特异性染色的结果，建议加上FCblock吧，另外，PE通道表达除了非特异性染色之外还有一个可 ...

谢谢大神！应该是非特异性的，厉害！

yangmengbo · 发表于 2018-4-4 19:39:33

niwanmao 发表于 2018-4-3 16:57
从你这个图形看，首先CD3＋细胞就稀稀拉拉几个，假如算20个，有2个阳性就是10％了，比例当然就不准了。

首 ...

谢谢倪老师！

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