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楼主: immunology

[结构和原理] MDSC流式圈门的问题

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发表于 2018-12-4 16:51:22 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-12-3 15:25
你的目的是什么?如果跟此主题无关的,建议开新帖提问,谢谢!

倪老师,您好,我不知道该怎么圈图中的MDSC,就是不知道怎么设MDSC的门,这是我以前跟我们有个老师一起做的,但是她后来辞职了,暂时也联系不上她,周围做过流式的也没有做这个MDSC,所以我想请教您该怎么圈MDSC的门??
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发表于 2018-12-5 15:34:21 | 显示全部楼层
phosphor850 发表于 2018-12-4 16:51
倪老师,您好,我不知道该怎么圈图中的MDSC,就是不知道怎么设MDSC的门,这是我以前跟我们有个老师一起做 ...

小鼠的MDSC设门,可参考5楼的。不过你的标记好像不够全哦。
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发表于 2018-12-10 16:48:04 | 显示全部楼层
immunology 发表于 2018-6-7 17:17
附曹雪涛院士编写的书里的一张图,做的是脾脏中MDSC中的情况。在FSC和SSC中,髓系的MDSC和淋巴细胞看着是能 ...

是来自曹雪涛教授的哪本书?
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发表于 2018-12-10 16:54:52 | 显示全部楼层
G-MDSC和PMN-MDSC细胞密度多少?人中性粒细胞的漂浮密度为1.080~1.085g/mL;嗜酸性粒细胞为1.09~1.095g/mL。Percoll分离的话有没有可能会会把G-MDSCs给沉淀到底部,影响实验结果。
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发表于 2018-12-12 08:40:32 | 显示全部楼层
jay_joy 发表于 2018-12-10 16:54
G-MDSC和PMN-MDSC细胞密度多少?人中性粒细胞的漂浮密度为1.080~1.085g/mL;嗜酸性粒细胞为1.09~1.095g/mL。 ...

做MDSC这些稀有细胞,不建议Ficoll分,而是建议全血直接染。
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发表于 2019-12-2 18:52:19 | 显示全部楼层
请教一个问题,BD网站搜Ly6G出来两个克隆号,RB6-8C5和1A8,前者anti-Mouse Ly-6G and Ly-6C,后者Anti-Mouse Ly-6G,两者的Alternative Name都有Gr-1,这两个抗体比较容易混,我的理解是做中性粒细胞要用RB6-8C5,做MDSC要用1A8,不知对不对,在此向各位老师请教,谢谢
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发表于 2019-12-3 09:58:19 | 显示全部楼层
mybiosciences 发表于 2019-12-2 18:52
请教一个问题,BD网站搜Ly6G出来两个克隆号,RB6-8C5和1A8,前者anti-Mouse Ly-6G and Ly-6C,后者Anti-Mou ...

RB6-8C5用的是小鼠的粒细胞作为抗原制备出来的,对Ly-6G亲和力强、对Ly-6C亲和力弱。
1A8用的是Ly-6G转染的EL-4J细胞株作为抗原制备出来的,所以只会结合Ly-6G。
MDSC确实需要按照6C和6G分出gMDSC和mMDSC,后者好一些。
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发表于 2019-12-4 07:06:41 来自手机 | 显示全部楼层
感谢倪老师的耐心回答,谢谢
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 楼主| 发表于 2020-3-7 05:52:20 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-12-3 09:58
RB6-8C5用的是小鼠的粒细胞作为抗原制备出来的,对Ly-6G亲和力强、对Ly-6C亲和力弱。
1A8用的是Ly-6G转染 ...

倪老师,我一直有个疑问,一直以来很多文献都说Gr-1这个marker包括Ly6G和Ly6C,那么Gr-1全称是什么呢?

我查ncbi和文献都没有对这个marker有过详细的解释,ncbi上的Gr-1跟Ly6G是同义词,是Ly6G的别名。那么Gr-1包括Ly6G和Ly6C这个出处在什么地方呢?Gr-1到底是什么分子或者分子复合体?
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 楼主| 发表于 2020-3-7 06:00:49 | 显示全部楼层
jay_joy 发表于 2018-12-10 16:48
是来自曹雪涛教授的哪本书?

<流式细胞术 原理、操作及应用>
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