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[流式分选] Th17细胞流式分选

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发表于 2018-8-2 14:45:19 | 显示全部楼层 |阅读模式
2流星
老师,您好,我之前请教过您“人外周血Th17和Treg细胞流式分选”的问题,您建议我去看八色方案。Treg细胞的抗体标记,我已经明白了,因为我还要进行后续的检测,所以不能用破膜剂,所以我选择CD4、CD25、CD127就可以了。关于Th17我还有点不明白,我看到之前有帖子说“用流式测人外周血Th17必须刺激,不刺激测不出来”。您的帖子“细胞因子胞内染色的相关刺激方案”我也看了。还是不理解,不知道该怎么选择抗体标记以及刺激。谢谢您~

发表于 2018-8-3 08:09:25 | 显示全部楼层
分选和检测不是一回事,检测的话,需要用PMA等刺激,使其胞内因子能够表达,从而破膜之后更好的检测到。
而你是需要分选和培养的,所以就不能进行破膜,可以用CD45、CD3、CD4、CXCR3和CCR6等表面标记组合起来进行分选。
发表于 2018-8-18 21:20:39 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-8-3 08:09
分选和检测不是一回事,检测的话,需要用PMA等刺激,使其胞内因子能够表达,从而破膜之后更好的检测到。
而 ...

倪老师,检测TH17是不是可以选用CD3CD4CD183CD196?
发表于 2018-8-19 13:04:06 | 显示全部楼层
aya9988 发表于 2018-8-18 21:20
倪老师,检测TH17是不是可以选用CD3CD4CD183CD196?

可以的。
发表于 2018-8-22 13:56:38 | 显示全部楼层
那倪老师,按照这个表面marker方案应该怎么来圈门呢?
发表于 2018-9-12 17:07:42 | 显示全部楼层

那倪老师,按照这个表面marker方案应该怎么来圈门呢?
发表于 2018-9-27 10:46:36 | 显示全部楼层
CXCR3=CD183 CCR6=CD196

人外周血TH17marker:CD45+CD3+CD4+CXCR3-CCR6+

参考文献:Standardizing immunophenotyping for the Human Immunology Project .Nature Review.2012
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