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[凋亡检测] Annexin V-FITC细胞凋亡检

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发表于 2018-9-11 11:23:16 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
刚做流式,想向大家请教几个问题:
1. 我的药物未处理组(第一张图)同时被FITC和PI标记上了,原因是什么?
2. 加药组的FITC/PI图,是细胞团没有分开吗?是因为补偿调的不好吗?

药物未处理组

药物未处理组

加药组

加药组

 楼主| 发表于 2018-9-11 11:27:28 | 显示全部楼层
1.png                              未加药组  
2.png       
                             药物处理组                  
刚才的图发错了
发表于 2018-9-11 17:35:50 | 显示全部楼层
pxt9098 发表于 2018-9-11 11:27
未加药组  
      
                             药物处理组              ...

AV/PI这样的分布,感觉像是非特异性似的。
圈左侧FSC较大的一群看看是否有变化?
 楼主| 发表于 2018-9-12 08:39:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-9-11 17:35
AV/PI这样的分布,感觉像是非特异性似的。
圈左侧FSC较大的一群看看是否有变化? ...

3.png
老师,圈左侧的情况是这样的
发表于 2018-9-12 10:58:57 | 显示全部楼层
pxt9098 发表于 2018-9-12 08:39
老师,圈左侧的情况是这样的

右侧这群呢?
 楼主| 发表于 2018-9-12 12:50:46 | 显示全部楼层
4.png
这是右侧的
发表于 2018-9-27 11:13:13 | 显示全部楼层
您检测的是贴壁细胞还是悬浮细胞呀?
补偿有没有调好,看下单染的流式图,一般横平竖直,就没问题。
 楼主| 发表于 2018-9-28 11:38:46 | 显示全部楼层
sunny2829 发表于 2018-9-27 11:13
您检测的是贴壁细胞还是悬浮细胞呀?
补偿有没有调好,看下单染的流式图,一般横平竖直,就没问题。 ...

我检测的是贴壁细胞,想请教一下调补偿的样品应该怎样制备?55℃水浴30min吗?
发表于 2018-9-28 11:58:49 | 显示全部楼层
单阳 1:Annexin V   凋亡诱导剂处理细胞。55℃30min这个方法我没用过,有老师用过,具体条件(温度时间)需要摸索。
单阳 2 :PI   取一半细胞加入 4% 多聚甲醛固定 ( 使细胞死亡 ),离心洗
涤后同另一半正常活细胞混合,再标记
 楼主| 发表于 2018-9-28 14:29:52 | 显示全部楼层
sunny2829 发表于 2018-9-28 11:58
单阳 1:Annexin V   凋亡诱导剂处理细胞。55℃30min这个方法我没用过,有老师用过,具体条件(温度时间) ...

好的 谢谢,下次做的时候改进一下
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