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[标本处理] Balce小鼠胸腺和脾脏比例不正确,看图有什么问题吗?

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发表于 2018-9-21 17:15:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
3流星
取Balce小鼠胸腺和脾脏,胸腺染色CD3-FITC,CD4-PE;脾脏染色CD3-FITC,CD4-PE,CD8-PerCP,做了几次,发现很多问题,希望各位大神老师能够指教
1. 胸腺中CD3的比例是45.8%,CD4的比例是83.13%,为什么CD4的比例会这么高?和抗体有关吗?还是存在没有裂解完全的红细胞?
2.脾脏中CD4和CD8的比例不对,散点图中的比例和直方图中的比例不统一/?
3.脾脏图中细胞出现火箭峰,代表都是死细胞吗?
4.为什么细胞感觉都散开了,不聚团?
我之前跑的C57小鼠的胸腺中CD4和CD8都不是这样的

THY

THY

SP-未染色

SP-未染色

SP-染色

SP-染色

C57-Thy

C57-Thy



发表于 2018-9-21 21:16:16 | 显示全部楼层
1、胸腺细胞的CD8有没有染?由于有较多的CD4+CD8+细胞,所以你单看CD4肯定如此。
2、脾脏的CD4、CD8补偿没有调好。不知道你为什么这么喜欢直方图,一旦做了多色标记,一定要看散点图,注意补偿。
3、4 不知道你指的是什么?
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