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Ki-67知多少?

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发表于 2018-10-9 11:16:48 | 显示全部楼层 |阅读模式

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自从Gerdes等人1983年发现人Ki-67抗原之后,这个分子已被广泛用于临床肿瘤学的预后和预测参数。Ki-67是核仁rRNA合成的关键因子,其表达水平与细胞进入S期之间存在一定的关系。
尽管Ki-67在组织病理学中得到广泛应用,但其在血液系统恶性肿瘤流式细胞术分析中的应用却很少。究其原因,有多方面原因,骨髓由非常异质的细胞群体组成,每个系列均存在不同程度的分化阶段,1983年发现之后,使用单色或双色流式细胞术,仅可以确定总骨髓细胞群的Ki-67表达,而不能区分不同的细胞谱系。此外,血液肿瘤的免疫分型对Ki-67的忽视。
因此,有必要采用多色流式,详细分析骨髓中不同群体的Ki-67表达。
Kelly P.H. Nies等人用10色流式分析粒系、单核系分化各阶段、干祖细胞、B系前体、红系分化各阶段的Ki-67表达水平。方案如下:

                               
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第一管——阴性对照,用CD13、CD34、HLA-DR和CD45圈中各系同型对照作为阴性对照设门参考。
第二管——分析粒系、单核系不同分化阶段的Ki-67表达。
第三、四管——分析红系分化各阶段的Ki-67表达。
设门方法和检测结果示例,下图是粒系和单核系的分化及其Ki-67表达:

                               
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下图是红系分化及其Ki-67表达,D图是浆细胞Ki-67表达:

                               
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下图是CD34+干祖细胞和B系前体细胞的Ki-67表达:

                               
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最后对50例样本进行统计,Box图呈现如下:

                               
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对粒系(A图)、单核系(B图)、红系(C图)各阶段的Ki-67表达率进行统计,绘制出如下的Ki-67变化图及其上下限:

                               
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有什么意义?
充分了解了每类细胞、每个阶段的Ki-67表达率,红系增殖最活跃,有核红之前的阶段几乎全表达,其它各系早期表达率在50%左右,随着细胞分化,Ki-67逐渐降低。根据这些,我们可以对骨髓中造血系统肿瘤多一个判断依据。
最后,流式中文网补充一句,个人感觉此处的对照设置还是欠妥当,因为第2、3、4管的配色和第1管对照管的配色不同,第1管无法作为一个正确的FMO对照,所以,可能在最终的比例上会有所偏差。后续,希望我们在临床实践中,能够站在这些人的基础上,进一步完善。
参考文献:Nies, et al. (2018). Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry Part A. doi:10.1002/cyto.a.23564
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