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[归档] 求问大鼠肺泡巨噬细胞极化的表面标记选择正确与否

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发表于 5 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
10流星
SD大鼠,取肺泡灌洗液后提取巨噬细胞来检测极化表型,现在是表面标记抗体已经买了,并不知道对不对,以及对照的设置等等,请各位大神帮忙分析分析,思路如下:先用APC-CD11b标出巨噬细胞群,然后用的是PE-CD86标记M1型巨噬细胞,FITC-CD206标记M2型巨噬细胞,之后CD11b+和CD86+的为M1型巨噬细胞,CD11b+和CD206+的为M2型巨噬细胞。



这样设计是否正确?是否需要设计同型对照和FMO对照?如果不对的话请问如何改正呢?

还请各路神仙帮帮忙,叩谢!!!

发表于 4 天前 | 显示全部楼层
可以完全参考这篇文章《Flow Cytometric Analysis of Macrophages and Dendritic Cell Subsets in the Mouse Lung》:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3824047/
 楼主| 发表于 前天 23:00 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-12-6 08:03
可以完全参考这篇文章《Flow Cytometric Analysis of Macrophages and Dendritic Cell Subsets in the Mous ...

如果不谈标记正确与否,这样设计三种荧光需要同型对照或者FMO对照吗?
发表于 昨天 20:28 | 显示全部楼层
xiao1203 发表于 2018-12-8 23:00
如果不谈标记正确与否,这样设计三种荧光需要同型对照或者FMO对照吗?

需要。
但有两点需要关注:
1、用死活染料排除死细胞。
2、需要阻断,降低Fc片段引起的非特异性结合。
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