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[其它临床检测] 关于血小板活化标志物的问题

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发表于 2010-11-9 17:30:12 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
想做PAC-1与CD-62P方面的实验,以前也给别人做过,但效果不太好,机采的血小板还没怎么处理,这两个指标就不同程度激活了,导致实验结果不好。想搞清楚是否拿抗凝血做效果能好些吗?那离心转数、离心时间、抗凝剂之类的对血小板激活是否也有些影响呢?我还应注意哪些问题才能把非特异激活因素的影响降到最低呢?


请指教!!!!!

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用全血做,抗凝用PPACK自己配成工作液,用好一点的空白采血管 试过用制备的PRP做,效果很不好,每个样品同时同一条件离心,富集程度不一样。而且离心(尤其是起步的时候)也是机械激活。还有采血管材质如果不行,表面附着也能激活。 不知道你们用什么激活剂 ADP? 我用过CRP ,ADP 和TRAP-6 amide
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发表于 2010-11-9 17:30:13 | 显示全部楼层
本帖最后由 zark_00 于 2011-7-26 15:24 编辑

用全血做,抗凝用PPACK自己配成工作液,用好一点的空白采血管
试过用制备的PRP做,效果很不好,每个样品同时同一条件离心,富集程度不一样。而且离心(尤其是起步的时候)也是机械激活。还有采血管材质如果不行,表面附着也能激活。
不知道你们用什么激活剂 ADP?
我用过CRP ,ADP 和TRAP-6 amide
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发表于 2010-11-9 21:08:53 | 显示全部楼层
没错,血小板活化很难做,所以我们觉得没有条件开展,于是现在一直没开展。

请见Current protocol in cytometry中的相关章节:
To minimize ex vivo platelet activation, blood samples should be processed within ∼30 min after drawing blood for many assays.
The act of drawing blood is itself a potential source of artifactual platelet activation; therefore, the following recommendations are suggested (Michelson et al., 2001):
1、Use a light tourniquet or none at all
2、Use a 21-G (or larger bore) needle
3、Ensure a smooth draw (i.e., good flow)
4、Discard the first 2 ml of blood drawn

更详细的资料可以见这篇帖子中FLASH文档的第2-4页:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=59&highlight=%E8%A1%80%E5%B0%8F%E6%9D%BF

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 楼主| 发表于 2010-11-10 09:02:23 | 显示全部楼层
谢谢,我改道吧,做别的。
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发表于 2011-3-25 14:17:49 | 显示全部楼层
晕啊, 本来也想做这个的,现在看来确实不好把握
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发表于 2011-3-25 21:07:16 | 显示全部楼层
我一直做,血小板不好找。
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发表于 2011-3-27 17:54:56 | 显示全部楼层
做血小板活化之类的实验,要用CTAD抗凝管。
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发表于 2011-4-27 15:01:45 | 显示全部楼层
标本要半小时送到,送检途中不能剧烈震动(看送血阿姨的良心了),送到了立即多聚甲醛固定。
能不开展的就不要开展,太烦!
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发表于 2011-4-27 18:22:01 | 显示全部楼层

呵呵,是的,这类项目的开展需要一大堆条件配套。
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发表于 2012-4-8 22:57:25 | 显示全部楼层
影响因素真是太多了!血小板真是挺麻烦的~~带我论文的老师就在做这个,结果很不尽如人意,不知她会怎么解决~~
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