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[结构和原理] 流式校准用微球可以用来检测荧光显微镜吗?

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发表于 2019-1-25 14:24:58 | 显示全部楼层 |阅读模式
5流星
各位大神,我是一名流式细胞的新手也就仅仅是用过而已,现在我们想做荧光显微镜的验证,没有查到相关的方法,我想着能不能使用流式用的标准微球作为检测媒介对荧光显微镜进行确认,目前荧光显微镜有FITC,DAPI,TRITC,PE四个模块,我不知道是不是可以使用荧光微球确认,比如我使用微球在FITC模块下就发绿光,在DAPI模块下就发蓝光,手边没有微球不知道可不可行,想问问大家这个原理可不可行。

发表于 2019-1-25 23:02:20 | 显示全部楼层
流式的微球很多,不知道你说的是哪个?
我用过补偿微球,可以在荧光显微镜下看到,前提是参数要相符
没有必要做什么验证,重要的是记住荧光显微镜的参数,使用时选择参数相符的荧光素。
另外,一般来说,荧光显微镜需要选择一些抗淬灭的荧光素(必须用时加抗淬灭剂),一些在流式上用的荧光素不一定适合在显微镜下使用。
发表于 2019-1-27 10:14:48 | 显示全部楼层
你是想用标记相应荧光素的微球,来验证荧光显微镜相关模块是否正常运作?应该可以,只是微球大多数自己不带荧光,你可以将其与标记荧光素的抗体结合再上去测。
 楼主| 发表于 2019-1-28 09:27:45 | 显示全部楼层
我的目的就是为了想验证显微镜的相关模块是否正常运作,法规规定所有检测设备都应通过验证,我这也是学疏才浅不知道怎么弄了,首先要找到大家认可的标准的物质去验证显微镜是否正常,我想着流式校准时的微球应该是带荧光的,才想出这么个办法,可是听您一说微球又不带荧光,我是还要用抗体结合才能有结果么?有没有已经带荧光的微球呢?
 楼主| 发表于 2019-1-28 09:28:31 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-1-27 10:14
你是想用标记相应荧光素的微球,来验证荧光显微镜相关模块是否正常运作?应该可以,只是微球大多数自己不带 ...

我的目的就是为了想验证显微镜的相关模块是否正常运作,法规规定所有检测设备都应通过验证,我这也是学疏才浅不知道怎么弄了,首先要找到大家认可的标准的物质去验证显微镜是否正常,我想着流式校准时的微球应该是带荧光的,才想出这么个办法,可是听您一说微球又不带荧光,我是还要用抗体结合才能有结果么?有没有已经带荧光的微球呢?
 楼主| 发表于 2019-1-28 09:31:13 | 显示全部楼层
mybiosciences 发表于 2019-1-25 23:02
流式的微球很多,不知道你说的是哪个?
我用过补偿微球,可以在荧光显微镜下看到,前提是参数要相符
没有必 ...

做验证是为了符合法规要求,只要在显微镜下能分辨出来就可以被认可,当然如果有更好的可以判定荧光强度的方法就更好了,目前我知道的同一样品在不同的荧光显微镜下的荧光强度值不一致,是有偏差的。
发表于 2019-1-28 10:13:29 | 显示全部楼层
fanow11 发表于 2019-1-28 09:28
我的目的就是为了想验证显微镜的相关模块是否正常运作,法规规定所有检测设备都应通过验证,我这也是学疏 ...

直接带荧光标记的可以找找看,或许有,只是我平时用的都是不带荧光的:)
发表于 2019-1-29 21:27:11 | 显示全部楼层
BD的B27的微球带荧光吧?
发表于 2019-1-30 21:51:15 | 显示全部楼层
acj 发表于 2019-1-29 21:27
BD的B27的微球带荧光吧?

那种微球应该不是楼主需要的。
发表于 2019-2-11 15:58:49 | 显示全部楼层
楼主是要做fish还是自免的检测?我觉得试剂盒里有阳性对照,加入荧光素应该就可以检测啦
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