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[标本处理] 封闭血清选择

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发表于 2019-2-11 15:09:02 | 显示全部楼层 |阅读模式
3流星
站长,各位站友,最近需要做封闭,之前看了站内的关于同型对照的帖子,除了商品化的封闭剂能有效降低非特异性染色,血清也是很好的选择。
我现在需要对人源的细胞进行封闭,以降低一抗非特异性染色,一抗是鼠单抗,二抗是羊抗鼠IgG PE,那么,我的封闭血清应该怎么选择呢?是用human IgG还是mouse IgG? 类似这种选择的原则是什么?

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直接买商品化的Fc block不是更好? 人IgG的话,可以买那种不分亚型,直接血清中提取的,例如:https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/i2511?lang=zh®ion=CN 因为你检测的是人细胞,所以用人IgG封闭人细胞表面的Fc受体。
发表于 2019-2-11 15:09:03 | 显示全部楼层
我想成大牛 发表于 2019-2-11 15:16
接上,我描述的有点问题,我想问的是应该选择哪种IgG,不是血清。

直接买商品化的Fc block不是更好?
人IgG的话,可以买那种不分亚型,直接血清中提取的,例如:https://www.sigmaaldrich.com/cat ... ng=zh&region=CN
因为你检测的是人细胞,所以用人IgG封闭人细胞表面的Fc受体。
 楼主| 发表于 2019-2-11 15:16:20 | 显示全部楼层
接上,我描述的有点问题,我想问的是应该选择哪种IgG,不是血清。
 楼主| 发表于 2019-2-12 08:30:34 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-2-11 18:24
直接买商品化的Fc block不是更好?
人IgG的话,可以买那种不分亚型,直接血清中提取的,例如:https://ww ...

我的用量很大,买商品化的试剂太贵了,所以退其次选择human IgG。谢谢站长的推荐。
 楼主| 发表于 2019-2-12 17:00:42 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-2-11 15:09
直接买商品化的Fc block不是更好?
人IgG的话,可以买那种不分亚型,直接血清中提取的,例如:https://ww ...

倪老师,我看了Elimination of Erroneous Results in Flow Cytometry Caused by Antibody Binding to Fc Receptors on Human Monocytes and Macrophages这篇文章,在实验方法部分,是先封闭,不做清洗直接做染色?还是需要洗去封闭剂在做染色?还是封闭染色同时进行?文章里它是封闭后就染活死细胞试剂了,我有点搞不清。我用美天旎商品化的Human Fc block是同时进行的。请倪老师教教我。
发表于 2019-2-12 23:24:32 | 显示全部楼层
我想成大牛 发表于 2019-2-12 17:00
倪老师,我看了Elimination of Erroneous Results in Flow Cytometry Caused by Antibody Binding to Fc  ...

可以洗,也可以不洗。
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