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[其它临床检测] 关于血浆微粒射门和定量的问题

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发表于 2010-11-15 15:37:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
倪老师,你好,好久不见。
以前曾经问过您关与检测微粒射门和定量的问题,在FSC-SSC图上圈出0.8μm的标准微球(APC标记)所在的区域,在此区域内分析目的微粒。
文献上说“The diameter of the beads (3 μm, gate B) discriminated
them from the MP population on the FSC-SSC
cytogram. A known number of beads was added to each
sample tube (e.g., 200,000), and the analysis was
stopped when 20,000 beads were counted.”
但是目前有一个问题,我0.8μm的微球是APC标记,两种抗体是PE和APC标记,那3μm的微球是不是要跟抗体的颜色不一样?

不同大小的颗粒,例如3μm和0.8μm如果发光相同,在流式图上能区分开吗?那我能选择PE或者APC标记的3μm的颗粒吗?

PS:因为买不到FITC标记的3μm的微球。只有红色或蓝色的荧光。

谢谢倪老师!

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发表于 2010-11-15 21:51:58 | 显示全部楼层
3μM的微球是为了定位你0.8μM颗粒的位置,所以只关系到FSC和SSC两个参数才对啊。
因此,我觉得应该是选择没有荧光的,以免干扰你那两种抗体的检测。
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 楼主| 发表于 2010-11-18 11:29:30 | 显示全部楼层
恩,我也是这样想的,要么用没有荧光的,要么用跟抗体荧光波长完全不重叠的荧光,谢谢倪老师!
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