找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 800|回复: 4

[结构和原理] 调补偿时,如果有阳性群有两个,应该选择哪一群调节补...

[复制链接]
发表于 2019-3-15 21:30:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
在做流式的时候,有的marker对应的阳性群明显的有两群,那么在选择marker的过程中,应该选择哪一群作为阳性群呢?有没有什么讲究。
例如CD44 marker,有明显的阴阳两群细胞,在flowjo或者diva软件上,从histogram图上的线性门 选择阳性细胞时,是把所有的阳性细胞都圈上,还是只圈某一群?
如下图所示。

CD44单阳管

CD44单阳管

negtive管

negtive管
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2019-3-15 21:39:19 | 显示全部楼层
假如选择高阳性群作为标准,那么对于低阳性群肯定就是补偿过当的,如果选择低阳性群,补偿对于高阳性群肯定就是补偿不足,就算选择中间的话,对于两边的细胞均不是恰当补偿,那么应该怎么办呢?
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2019-3-16 00:46:50 | 显示全部楼层
选高的就行,这个主要是看两个通道之间的overlap, 求一个百分比, 所以如果这两个都是真实信号的话,理论上对其他通道的overlap都一样,选高的可以让误差小一点。但如果有一个是自发荧光之类的假信号,那就不一样了,需要谨慎排除。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2019-3-16 07:54:13 | 显示全部楼层
immunology 发表于 2019-3-15 21:39
假如选择高阳性群作为标准,那么对于低阳性群肯定就是补偿过当的,如果选择低阳性群,补偿对于高阳性群肯定 ...

如果确实存在像你说的这种情况,那么说明这里面肯定有非荧光渗漏因素在里面,例如@robert1988 所说的一些非特异性荧光,我们平时临床免疫分型也碰到过类似情况,由一些死细胞引起。
所以要找最高、且特异性高的阳性群调节补偿。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2019-3-16 18:36:00 | 显示全部楼层
嗯 要结合FSC/SSC 的门看看啥样,尽量看点图来调补偿, 峰图不清楚的,而且也不准确
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2|浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-3-28 19:59

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表