做出来Treg占比超级超级高是怎么回事？

nannan

各位老师好，我做的是动脉粥样硬化模型 APOE小鼠的脾脏  用cd4 cd25 foxp3染的Treg

查文献Treg细胞占比大概是5%-10%，但是我重复了很多次 不同组 Treg的占比都是20%以上

请教一下是怎么回事？是我做错了吗？

nannan

再补充一下

liuruiluna

疾病模型的，这个不好说是应该一定你做的有问题，做没做对照组，正常小鼠的你做出来是多少呢？ 再就是可以染个死活染料，也是使数据更准确的一个点

nannan

liuruiluna 发表于 2019-3-16 18:32
疾病模型的，这个不好说是应该一定你做的有问题，做没做对照组，正常小鼠的你做出来是多少呢？ 再就是可以 ...

老师好  空白的非模型小鼠 染出来也是比其他文献中的高

liuruiluna

那最好是看一下所加抗体的量，是否有过量的问题，滴定抗体用量。再就是看看染死活染料，和圈出单个细胞的门，排除非特异性结合

niwanmao

nannan 发表于 2019-3-16 15:28
再补充一下

你把LYMPHOCYTES门拖到其它位置，或者看CD4-部分，这个Treg门内的信号是怎么变的？

nannan

niwanmao 发表于 2019-3-17 14:52
你把LYMPHOCYTES门拖到其它位置，或者看CD4-部分，这个Treg门内的信号是怎么变的？ ...

老师好，按您说的调了一下  更高了

niwanmao

nannan 发表于 2019-3-17 23:53
老师好，按您说的调了一下  更高了

从移动门的位置的分群看，没有问题。结果是真实的。
至于比例，我认为是可靠的。你说的5～10％是Treg在外周血中占CD4+T的比例，而不是脾脏。在组织中，不同的疾病会有不同的变化。

nannan

niwanmao 发表于 2019-3-18 09:10
从移动门的位置的分群看，没有问题。结果是真实的。
至于比例，我认为是可靠的。你说的5～10％是Treg在外 ...

有底气了 好的 谢谢老师

我想成大牛

nannan 发表于 2019-3-18 18:01
有底气了 好的 谢谢老师

但是我觉得你还是需要将FSC/SSC的门圈大一点，把淋巴细胞圈的完全一些，数据会更好。