常说流式没法诊断慢粒，这里有一个简单的新指标：CD26＋LSC

niwanmao

慢性粒细胞白血病（CML）是一种骨髓增生性疾病，其特征在于CML患者的外周血（PB）和骨髓（BM）中未成熟髓系细胞的恶性增殖，而分化能力却仍保留着。 其发病率为每10万名成人1～2例，占新诊断白血病病例的约15％。 CML是分子水平上特征就是费城染色体（Ph）和BCR-ABL1融合蛋白，95％的CML患者存在t(9;22)(q34; q11)。

CML诊断通常需要细胞遗传学分析Ph染色体，或通过荧光原位杂交（FISH）或通过分子研究的BCR-ABL1异常。 然而，在某些情况下，可能难以将CML与可能含有BCR-ABL1融合基因的其他骨髓增生性疾病或骨髓增生异常综合征区分开，而且，细胞遗传学和分子分析都偏贵并且需要数天才能完成。
曾经，Bethesda共识将CML列为流式诊断血液肿瘤的禁区，因为此类异常的成熟粒细胞在表型上与正常相差无几，没法通过表型区分开。我在2013年曾经发表过《Discrimination of malignant neutrophils of chronic myelogenous leukemia from normal neutrophils by support vector machine. 》，利用支持向量机结合几个免疫标记，在多维角度进行区分，得到95％左右的特异度和灵敏度，但是在实际应用中，还是存在较大的障碍，因为建模需要较多正常和CML样本，耗费时间较长，判断时需要将数据导出为特殊的文本格式。

2019年2月份，意大利的Donatella Raspadori等人在《Flow Cytometry Assessment of CD26+ Leukemic Stem Cells in Peripheral Blood: A Simple and Rapid New Diagnostic Tool for Chronic Myeloid Leukemia.》一文中，给我们带来了一个新指标：CD26＋白血病干细胞（LSC，Leukemia Stem Cell），设门也非常简单，就是圈中CD34＋CD38－的LSC（正常HSC表型为CD34＋CD38＋），分析其中CD26的表达率，见下图，其中f图为CD26的同型对照，g图为CD26表达率，这是一例临床疑诊CML的患者：

测试结果看上去还不错，作者检测了243名疑诊CML的白细胞增多患者的外周血 CD26 + LSCs，发现211/243存在CD26阳性表达，随后通过FISH和RT-PCR确认211/211（100％）为BCR-ABL1阳性；而那32个CD26阴性的样本，在传统的细胞遗传学和分子检测后，没有一个是CML。 在评估CD26 + LSCs阳性的211个样本中，CD34+CD38-LSC中CD26+表达率的中位百分比为37.99％（范围1.11-99.85），CD26 + LSCs绝对数的中位数为10.46×10E9/L（范围0.010～1037×10E9/L）。

流式中文网注：看到上面这两个数据，我有点奇怪，首先堂堂的Cytometry B杂志里面，居然把小数点表示为英文逗号，我这里暂且将其改回来。其次明明说211例均为CD26阳性，但是表达范围却是从1.11开始，难道他们不是以百分比判断，而是以有无表达来判断？所以对此文章暂且保留一点疑问，在临床实际案例中我们测试起来，看看效果，究竟是老外造假？还是真有这么好的指标？

流式诊断白血病和淋巴瘤的道路，虽然与其它应用相比最成熟，但还是有很多工作需要做。

btx362237729

CD34+CD38-LSC中CD26+表达率的中位百分比为37.99％（范围1.11-99.85）。。。范围1.11开始，神奇。

niwanmao

btx362237729 发表于 2019-3-20 15:07
CD34+CD38-LSC中CD26+表达率的中位百分比为37.99％（范围1.11-99.85）。。。范围1.11开始，神奇。 ...

而且原文中是用逗号，而不是用小数点。
1,11-99,85
所以我觉得很奇怪，这样的文章也发出来了，而且是流式专业的权威杂志。

特勒兮兮

有一个问题，之前看到 有书籍说，急性白血病患者外周血中CD45会降低表达，自己也做过实验，仅GATE淋巴细胞群的B淋巴细胞（CD19）60%，GATE    CD45阳性的细胞群，B淋巴细胞有90%以上,请问这个时候用CD45来圈门还合适吗？

niwanmao

特勒兮兮 发表于 2019-3-22 10:27
有一个问题，之前看到 有书籍说，急性白血病患者外周血中CD45会降低表达，自己也做过实验，仅GATE淋巴细胞 ...

不太理解这个意思。
CD45/SSC散点图上，原始细胞都在中间这个区域，本就应该用CD45/SSC设门的。

特勒兮兮

niwanmao 发表于 2019-3-22 12:23
不太理解这个意思。
CD45/SSC散点图上，原始细胞都在中间这个区域，本就应该用CD45/SSC设门的。 ...

我的意思是看到有流式书上说，急淋病人外周血中CD45会降低表达，所以用CD45圈的淋巴细胞是不是不完全是体内的淋巴细胞。

特勒兮兮

niwanmao 发表于 2019-3-22 12:23
不太理解这个意思。
CD45/SSC散点图上，原始细胞都在中间这个区域，本就应该用CD45/SSC设门的。 ...

为啥上传不了图片，要输入链接地址？？？？

niwanmao

特勒兮兮 发表于 2019-3-22 15:08
我的意思是看到有流式书上说，急淋病人外周血中CD45会降低表达，所以用CD45圈的淋巴细胞是不是不完全是体 ...

这个帖子是说CML的，你讨论到急淋去了

急淋病人CD45降低，这个说法就不严谨，准确地说是急淋病人那些白血病细胞的CD45表达，和其正常的细胞相比是降低的。但这个只是大多数病人，有少数T-ALL的白血病细胞CD45是不降低的。
上面是一个概念问题，回到你的实验目的，从另一个帖子看出来你的实验目的是想圈正常淋巴细胞，那么大多数情况下是可以用CD45/SSC圈淋巴细胞区域，是可以排除掉白血病细胞，准确圈中正常淋巴细胞的，但为了保险起见，建议加用CD34等标记排除掉白血病细胞。