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[淋巴细胞亚群] 请教淋巴细胞画门问题

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发表于 2019-4-10 16:37:49 | 显示全部楼层 |阅读模式
2流星
检测小鼠肿瘤组织中细胞表面抗原CD3 CD4 CD8的占比,最后画出来的CD3 CD4 CD8未分群,不知何缘故,是否样本原因? 或是画门不当,跪求解答,附件为测试样本及单管荧光,感谢

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21-2 3.zip

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28-2 3.zip

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B21.fcs.zip

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空白 单管荧光.zip

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发表于 2019-4-10 17:18:12 | 显示全部楼层
本帖最后由 tiger 于 2019-4-10 17:19 编辑

要用CD45圈淋巴细胞,并加死活染料。
 楼主| 发表于 2019-4-10 20:39:30 | 显示全部楼层
tiger 发表于 2019-4-10 17:18
要用CD45圈淋巴细胞,并加死活染料。

老师,我看文献上没用CD45圈淋巴细胞呢,他就是同时染了CD3,CD4,CD8抗体,然后以CD3为门控,画出CD4 CD8,这样不可以么,不是很明白,还请赐教
发表于 2019-4-11 08:42:35 | 显示全部楼层
选了一个数据看,首先,仪器存在液路不稳定,可能流动室比较脏,对信号有影响;其次,样本状态不好,大多是死细胞,所以需要优先使用新鲜样本。
这两个问题解决了,可能你的结果就会改善。
20190411083946.png
发表于 2019-4-11 15:57:35 | 显示全部楼层
michellexiao 发表于 2019-4-10 20:39
老师,我看文献上没用CD45圈淋巴细胞呢,他就是同时染了CD3,CD4,CD8抗体,然后以CD3为门控,画出CD4 CD8 ...

你是分析肿瘤组织中Til的占比,还是分析Til中CD4+T和CD8+T的占比?不论分析哪个指标,CD45都是必须的,因为TIL在肿瘤细胞中很难用FCS/SSC圈出来。
 楼主| 发表于 2019-4-11 21:16:09 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-4-11 08:42
选了一个数据看,首先,仪器存在液路不稳定,可能流动室比较脏,对信号有影响;其次,样本状态不好,大多是 ...

万分感谢倪老师~  涨经验了,再进步
 楼主| 发表于 2019-4-11 21:17:27 | 显示全部楼层
tiger 发表于 2019-4-11 15:57
你是分析肿瘤组织中Til的占比,还是分析Til中CD4+T和CD8+T的占比?不论分析哪个指标,CD45都是必须的,因 ...

非常谢谢老师的解答,赶紧加订CD45去~
发表于 2019-5-18 19:34:07 | 显示全部楼层
本帖最后由 qingshi 于 2019-5-18 19:51 编辑
niwanmao 发表于 2019-4-11 08:42
选了一个数据看,首先,仪器存在液路不稳定,可能流动室比较脏,对信号有影响;其次,样本状态不好,大多是 ...


肿瘤细胞til分析,需要去死活,和组织新鲜不新鲜无关,CD45染色必须的,有的肿瘤做富集是必须的。
发表于 2019-5-19 20:15:28 | 显示全部楼层
qingshi 发表于 2019-5-18 19:34
肿瘤细胞til分析,需要去死活,和组织新鲜不新鲜无关,CD45染色必须的,有的肿瘤做富集是必须的。 ...

我们临床上处理有深刻体会,新鲜、处理手法到位,很重要。
发表于 2019-5-21 10:38:29 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-5-19 20:15
我们临床上处理有深刻体会,新鲜、处理手法到位,很重要。

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