流式检测IL-10的刺激方法

一枝孤芳 · 发表于 2019-4-17 08:09:18

有和IFN－gmma一起测，不过IFN－gmma有数据，il-10没有

小外星人 · 发表于 2019-4-26 06:41:56

建议用BD的细胞固定/透化套装，测胞浆的细胞因子比较好。eBioscience的那套装主要用FOXP3的，这个是存在细胞核内的转录因子。
BFA好像量也多了一些。

liuruiluna · 发表于 2019-4-29 11:42:59

楼主用的ebioscience不是foxp3套装，用的是胞浆染色那套破膜液。看看染色过程，比如抗体用量、染色时间

Cleopatra · 发表于 2019-6-24 17:14:27

兄台，请问你的IL-10现在染出来了吗？我也是用PMA50ng/ml 离子霉素1ug/ml 莫能霉素1ul加入 24-well 500ul体积 2乘10的6次方体系里，刺激5h，IL-10不表达，捉急死了

Cleopatra · 发表于 2019-6-24 17:15:18

niwanmao 发表于 2019-4-12 13:22
看条件还可以，种下去的细胞量和收获的细胞量分别是多少？

倪老师，求帮助，IL-10一直染不上。。。

niwanmao · 发表于 2019-6-24 18:00:36

Cleopatra 发表于 2019-6-24 17:14
兄台，请问你的IL-10现在染出来了吗？我也是用PMA50ng/ml 离子霉素1ug/ml 莫能霉素1ul加入 24-well 500u ...

mybiosciences · 发表于 2019-6-26 10:13:39

你的实验目的是什么呢？
为何要用pma/离子霉素刺激？
这两个试剂都是绕过抗原识别直接打开信号通道，，不一定符合你的实验目的

stf1990 · 发表于 2019-6-27 00:22:54

你是要激活细胞吗，还是只需要刺激细胞产生IL－10而已？

Cleopatra · 发表于 2019-7-16 19:30:41

niwanmao 发表于 2019-6-24 18:00
看一下这篇文章，试着把莫能霉素去掉试试：

倪老师，参照文章建议尝试了下，但是影响其他胞内因子表达量，对IL-10影响无明显变化，不甚理想

bluefish · 发表于 2019-7-17 00:22:28

能看看你panel的配色吗

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