抗体荧光标记有哪些试剂盒可以推荐的

melodysz · 发表于 2019-4-23 19:24:08

各位，我想做抗体的PE标记，请问有哪些试剂盒可以推荐的，我查到Abcam，Thermo，Expedeon有PE标记试剂盒，但问题是我需要试剂盒最好能提供检测标记效率的方法，有哪位大神做过？国产试剂盒也行，万分感谢！

kuzhierran · 发表于 2019-4-23 19:24:09

进口试剂中Innova的PE标记试剂盒使用过，效果还不错。

国产试剂盒中四正柏PE微量标记试剂盒，效果也不错。

据我所知，目前商用试剂盒中都没有标记效率检测的试剂。标记效率您可以用紫外分光光度计A280和A565来计算。

melodysz · 发表于 2019-4-26 09:59:07

kuzhierran 发表于 2019-4-23 19:24
进口试剂中Innova的PE标记试剂盒使用过，效果还不错。

国产试剂盒中四正柏PE微量标记试剂盒，效果也不错。 ...

谢谢您的答复！A565是检测这个染料的吗？我看了Thermo的说明书，有个计算公式A = εcL，ε是extinction coefficient，Thermo给出的数值是1960000 M-1 cm-1，不知道这个数值如果我用其他品牌的试剂盒能不能用？A280的话好像是测蛋白浓度的，但是要减去A565漏过去的吸光值，就跟荧光补偿一样，这边就有一个correction factor，这个值我不知道去哪里查，请参考下面的公式：
Protein concentration (mg/ml) =[A280 – 0.03(A650)] × dilution factor/A280 of protein at 1 mg/ml
In this equation, 0.03 is a correction factor for the fluorophore’s contribution to the A280

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