查看: 367|回复: 8
收起左侧

流式细胞仪检测细胞死细胞和活细胞占的比例

[复制链接]
发表于 2019-6-11 16:57:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
20流星
实验对象为海洋裸甲藻,想看一下处理样品中死细胞和活细胞各自占的比例,百度发现PI单染流式细胞仪可以检测,但不知道具体还怎么测?有没有具体的步骤可以借鉴,谢谢

发表于 2019-6-12 10:31:06 | 显示全部楼层
藻类测死活?这个没试过。你直接用低浓度PI染料染不出来吗?
 楼主| 发表于 2019-6-13 21:16:25 | 显示全部楼层
谢谢老师,我前几天在资料里看到您分享的PI单染测细死细胞的那个步骤了,我准备试一下,过几天做完之后再与老师分享
发表于 2019-6-13 22:16:30 | 显示全部楼层
Ollie 发表于 2019-6-13 21:16
谢谢老师,我前几天在资料里看到您分享的PI单染测细死细胞的那个步骤了,我准备试一下,过几天做完之后再与 ...

好的。
 楼主| 发表于 2019-6-17 21:51:03 | 显示全部楼层
老师,我今天测了处理六小时的,从图上看,对照就死了很多,不知道是不是我这批藻不行。老师不固定是不是会死的比较快?
发表于 2019-6-18 14:17:15 | 显示全部楼层
Ollie 发表于 2019-6-17 21:51
老师,我今天测了处理六小时的,从图上看,对照就死了很多,不知道是不是我这批藻不行。老师不固定是不是会 ...

你的染色步骤是?
 楼主| 发表于 2019-6-19 11:11:28 | 显示全部楼层
1500g离心,用200ul PBS悬浮,加1u l PI混匀转入流式管,然后测
发表于 2019-6-19 16:12:54 | 显示全部楼层
Ollie 发表于 2019-6-19 11:11
1500g离心,用200ul PBS悬浮,加1u l PI混匀转入流式管,然后测

藻类的离心速度我不清楚多少合适,你可以摸索一下。
PI浓度不要太高,终浓度在5ug/ml左右。
染色时间2分钟,不要超出太久。
不过还有一个非常重要的问题,你们用的藻类里面有没有藻红素蛋白,如果有的话,就不能用PI了,因为藻红素蛋白会发自主荧光,与PI通道一样,得改用hoechst紫外染料。
 楼主| 发表于 2019-6-19 16:21:15 | 显示全部楼层
嗯嗯好的老师,我查一下
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网    

GMT+8, 2019-12-15 07:59

Powered by Discuz! X3.2

© 2001-2013 Comsenz Inc.