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[其它] 关于流式保存液与染死活的氨基酸染料

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发表于 2019-6-12 17:14:52 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
买了流式中文网的流式保存液,用保存液保存的细胞就不能再用7AAD这种来染死活了。
那我能不能先用染死活的氨基酸染料染个死活,再用流式保存液保存,后面再染表面marker,上机检测?

发表于 2019-6-13 10:39:57 | 显示全部楼层
是的,保存液因为有缓释的轻微固定作用,所以不能用核酸类死活染料。
另外一类死活染料,不叫氨基酸染料,而是胺类反应性染料,这类染料染好之后,再固定破膜是可以,但是长期保存,会存在荧光衰减的问题。

我们平时使用的体会是,由于新鲜采集的样本,几乎不会有细胞死亡,所以此时加入保存液,由于缓释的固定作用,细胞都是一致性处于同一状态,因此不需要区分死活。当然,即使经过这种特殊固定,少数细胞也会崩解,那时候“死”掉的细胞,都是直接成碎片的,在FSC/SSC是很容易区分开的,不像未经保存液处理的样本是逐步皱缩死亡导致分群不清。
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