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楼主: cccssszzz08

[标本处理] 全血提取淋巴细胞存放过程中的变化

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 楼主| 发表于 2019-7-1 23:32:01 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-7-1 20:23
会有,后来应该是粒细胞死的快。
但你这里新鲜的时候反而是没看到,在后面越来越多,这就解释不通了。
下 ...

好嘞,有空我试一试哈
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 楼主| 发表于 2019-7-1 23:33:27 | 显示全部楼层
路缀轻 发表于 2019-7-1 13:25
全血样本离开人体后,随着时间延长,粒细胞会活化从而降低密度。如果是使用密度梯度离心法分离淋巴细胞的 ...

谢谢您的回复。可是有个问题就是,为啥粒细胞增多了,但是淋巴细胞的比例却没有变呢?如果每次收集同样数目的细胞,那么粒细胞增多,淋巴细胞比例降低才对啊。
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发表于 2019-7-2 16:51:03 | 显示全部楼层
cccssszzz08 发表于 2019-7-1 23:33
谢谢您的回复。可是有个问题就是,为啥粒细胞增多了,但是淋巴细胞的比例却没有变呢?如果每次收集同样数 ...

还有碎片在里面干扰了细胞比例呀,你看第一图,碎片占90%,后面的图由于粒细胞比例升高,相应地碎片比例降下来了。我觉得是因为你分离的淋巴细胞里面碎片占了绝大部分,淋巴细胞的比例只有个位数,由于粒细胞比例变化而导致淋巴细胞比例的波动变化不会太明显的。除非你排除了碎片后只分析细胞。另外,建议你去详细了解一下外周血单个核细胞用密度梯度分离。正常情况下,新鲜样本分离后粒细胞不会有太多残留在PBMC中的,有些样本分离后粒细胞能达到低于1%。
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发表于 2019-7-7 10:41:01 | 显示全部楼层
建议,每次染色结束,来不及上机,可用4%组织细胞固定液(或者4%多聚甲醛重悬待上机),一般不是特殊难用的染色(如PE-Cy7,PE Dassle Tm 594欧联时间久了容易降解为PE,建议用APC,PE,FITC等,最好3天内上机检测)

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